新生兒溶血病發(fā)病風險因素分析及相關(guān)檢測實驗條件驗證.pdf

1、目的：
　　通過文獻分析，獲得可能導致新生兒溶血病(heamolytic disease of the newbornHDN)發(fā)病的相關(guān)危險因素;結(jié)合臨床實際，針對HDN實驗室診斷檢測中最常見的且尚有爭議的問題——IgM抗體存在可影響IgG抗體效價準確檢測，研究適合臨床HDN實驗室診斷的IgG抗體效價準確檢測的實驗條件。
　　方法：
　　1.采用新生兒溶血病相關(guān)檢索詞檢索中文及英文醫(yī)學數(shù)據(jù)庫。通過閱讀文獻題目和摘要篩選

2、出關(guān)于新生兒溶血病發(fā)病危險因素的文獻，篩查可能與HDN發(fā)病相關(guān)的危險因素。
　　2.用人源血漿及單克隆IgG和單克隆IgM抗D標準試劑血清配置4組不同效價配比的模擬血漿，效價分布分別為:128+512、128+128、128+32和128+8(IgG+IgM)。用等體積2-Me與模擬血漿混合，在室溫和37℃兩種條件孵育30min破壞IgM抗體，分別用鹽水血凝法和微柱凝膠抗人球蛋白法檢測模擬血漿破壞前后IgM和IgG抗體效價。

3、>　　3.用等體積2-Me分別在室溫和37℃孵育30min破壞孕婦血漿內(nèi)IgM抗體，并分別用鹽水血凝法和微柱凝膠抗人球蛋白法檢測血清破壞前后IgM和IgG抗體效價。
　　4.應用免疫蛋白電泳對待檢血清進行IgM和IgG免疫球蛋白定性檢測，通過免疫蛋白定量檢測2-Me破壞IgM抗體前后IgG和IgM的變化水平，評估2-Me對IgM抗體的處理效果及時IgG抗體效價的影響。
　　結(jié)果：
　　1.母親年齡、母嬰血型不合、不規(guī)則

4、抗體、IgG抗體效價、懷孕次數(shù)、流產(chǎn)史、死胎史、輸血史等均有報道與新生兒溶血病發(fā)病相關(guān)。
　　2.模擬血漿的4組標本用2-Me在室溫和37℃兩種不同條件破壞IgM抗體的效果無統(tǒng)計學差異(p＞0.05);當IgM≤gG抗體效價時，IgG抗體效價不受IgM干擾，檢測結(jié)果與已知結(jié)果一致;當IgM＞IgG抗體效價時，IgM可掩蓋IgG抗體效價結(jié)果，導致IgG效價檢測結(jié)果偏高。破壞前檢測IgG效價為128，IgM效價不同的3組標本IgG抗體

5、效價分數(shù)與IgM效價成正相關(guān)，破壞后4組IgG抗體效價分數(shù)差異無統(tǒng)計學意義。
　　3.人源血清標本破壞后IgM抗體效價顯著降低(P＜0.05); IgM抗體破壞前、室溫破壞后、37℃破壞后IgG抗體效價檢測結(jié)果無統(tǒng)計學差異(p＞0.05);室溫和37℃兩種條件破壞IgM抗體后，IgG抗體效價分數(shù)無顯著性差異(p＞0.05)，均較破壞前降低(p＜0.05）。
　　4.定量分析結(jié)果表明，2-Me破壞前后模擬血漿和患者標本IgM抗