人尿中尼古丁及其代謝產(chǎn)物可的寧的測(cè)定方法研究.pdf

1、目的：采用固相萃取進(jìn)行樣品前處理，建立同時(shí)測(cè)定人尿樣品中尼古丁及其代謝產(chǎn)物可的寧的火焰離子化檢測(cè)．氣相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。在實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制基礎(chǔ)上，采用固相萃取-火焰離子化檢測(cè)器．氣相色譜法對(duì)607份人尿樣本進(jìn)行了測(cè)定，并用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行了驗(yàn)證。本研究為我國(guó)煙草控制的流行病學(xué)調(diào)查和吸煙行為干預(yù)提供可靠的檢測(cè)手段和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 方法：對(duì)尿液中尼古丁及其代謝產(chǎn)物可的寧測(cè)定的前處理和色譜條件進(jìn)行了優(yōu)化，分別建

2、立了兩種檢測(cè)方法： 1．按基線調(diào)查資料將尿樣分成非吸煙、被動(dòng)吸煙和吸煙三組。采用C<,18>固相萃取小柱富集、凈化尿液中的尼古丁和可的寧，磷酸鹽緩沖液(pH=7.5)調(diào)節(jié)pH值后上柱，用O.4％氨水溶液(v／v)淋洗雜質(zhì)，甲醇-4％醋酸(90:10,v／v)洗脫待測(cè)物，氮?dú)獯蹈啥ㄈ莺?，用氣相色譜-火焰離子化檢測(cè)器測(cè)定，根據(jù)保留時(shí)間定性，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。 2．同一尿樣經(jīng)處理后，在優(yōu)化的色譜條件下，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法同

3、時(shí)測(cè)定尼古丁及其代謝產(chǎn)物可的寧，與氣相色譜法(火焰離子化檢測(cè)器)的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較。 結(jié)果：1．優(yōu)化了固相萃取條件和氣相色譜測(cè)定條件，建立了同時(shí)測(cè)定尿樣中尼古丁、可的寧的火焰離子化檢測(cè)-氣相色譜法，尼古丁和可的寧的線性范圍分別為0.10μg/ml～100μg／ml和O.20μg/ml～200μg/ml，本方法的最低檢出濃度為尼古丁0.6ng/ml尿和可的寧1.2ng/ml尿。尼古丁和可的寧測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別為2.5

4、0％～4.70％和4.20％～5.10％，加標(biāo)回收率分別為80.00％～88.00％和78.85％～103.8％。 2．在同樣的前處理方法下，利用氣相色譜．質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定尿液中的尼古丁及其代謝產(chǎn)物可的寧。尼古丁和可的寧的線性范圍分別為4.0ng/ml～40ug/ml和20.0ng/ml～80ug/ml，方法的最低檢出濃度為尼古丁0.02ng/ml尿和可的寧0.14ng/ml尿。測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.42％～2.80％

5、和0.80％～2.71％，加標(biāo)回收率分別為74.83％～95.56％和83.33％～94.44％。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，兩種方法的測(cè)定結(jié)果無(wú)顯著性差異(t=-1.591，P=0.115和t=1.845，P=0.068)。 結(jié)論：本研究建立了同時(shí)檢測(cè)人尿中的尼古丁及其代謝產(chǎn)物可的寧的固相萃取-火焰離子化檢測(cè)．氣相色譜法，具有快速、簡(jiǎn)便、分析成本低等優(yōu)點(diǎn)，用于大量樣品的檢測(cè)，取得了滿(mǎn)意的結(jié)果。所建立的固相萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法具有檢出限低