上頜骨經縫牽引組織再生的基礎研究.pdf

1、上頜面中部發(fā)育不足是口腔頜面外科一種常見畸形，常見的治療方法有正畸牽引、正頜外科、牽引成骨等。近來縫牽引以其微創(chuàng)、風險小、可早期治療上頜面中部發(fā)育不足而得到了大多數(shù)學者認可。但對于縫牽引的最佳作用力及縫牽引的組織再生方式仍不清楚。為解決上述問題，本研究以生長期犬為動物模型，采用微型鎳鈦合金牽引器，經腭橫縫和額上頜縫牽引，試圖了解不同牽引力作用下縫組織再生情況。 第一部分、幼犬上頜骨經縫牽引的組織學研究 目的：為探索一種新

2、的上頜牽引方法的可行性及組織學改變，本研究擬采用內置式微型鎳鈦合金牽引器，對幼犬腭橫縫及額上頜縫行持續(xù)牽引來擴張腭橫縫，前移上頜骨復合體，以組織學各方面指標來探討不同牽引力對腭橫縫組織影響。 方法：以3～4月齡健康雜種犬24只為實驗動物，隨機分為4組，實驗組分A、B、C組，每組6只，空白對照組6只。實驗組在兩側腭橫縫及額上頜縫安置內置式鎳鈦合金牽引器，對照組不處理。設計各牽引器作用于上頜骨縫初始牽引力分別為：900g(A組)，1

3、200g(B組)、1500g(C組)。術后定期拍攝X片，以觀察上頜骨牽引位移情況。于牽引5、10、15、20、30、40天過量麻藥肌注處死各組動物中一只，切取腭橫縫組織，行HE、甲苯胺藍及天狼猩紅染色，Olympus顯微鏡及暗視野偏振光顯微鏡下對其進行組織學觀察。 結果：實驗組上頜骨被成功前徙，以C組最明顯。3種牽引力組織學表現(xiàn)無明顯差異，初期腭橫縫逐漸增寬，骨突起拉長，成骨細胞數(shù)量增多，呈多層排列，成纖維細胞增生活躍，膠原纖維

4、排列紊亂，組織間有少量血細胞滲出。后期骨縫接近正常寬度，膠原纖維排列整齊。天狼猩紅染色見牽引期內Ⅰ型膠原增多明顯，Ⅱ、Ⅲ型膠原逐漸減少。甲苯胺藍染色未見有軟骨細胞及軟骨細胞團出現(xiàn)。 結論：對于上頜發(fā)育不足畸形，縫牽引是一種可行的治療方法。在1500g力范圍內牽引力越大，骨縫擴張越快，上頜骨前移越明顯。牽引期縫組織內有新骨組織形成。 第二部分、幼犬腭橫縫牽引的超微結構觀察 目的：了解不同牽引力對幼犬腭橫縫組織內各種

5、超微結構影響。 方法：以3～4月齡健康雜種犬12只為實驗動物，隨機分為4組，實驗組分A、B、C組，每組3只，空白對照組3只。實驗組在兩側腭橫縫及額上頜縫安置內置式微型鎳鈦合金牽引器，對照組不處理。設計各牽引器作用于上頜骨縫初始牽引力分別為：900g(A組)、1200g(B組)、1500g(C組)。于牽引10、20、40天處死各組動物一只，取一塊腭橫縫組織，修整成1mm3，常規(guī)制作透射電鏡標本，行超微結構觀察。 結果：實驗

6、各組鏡下表現(xiàn)未見有明顯區(qū)別，牽引初期縫組織出現(xiàn)斷裂間隙，膠原纖維排列松散，后期見大量增生活躍的成骨細胞，內含擴張粗面內質網，網腔內充滿低電子密度絮狀物，膠原纖維排列緊密、整齊。40天可見新生骨基質。 結論：在牽引力作用下，初期骨縫組織出現(xiàn)輕微損傷性改變，繼而表現(xiàn)出新骨組織再生過程。鏡下未見軟骨細胞。 第三部分、幼犬腭縫牽引單位骨量堿性磷酸酶變化研究 目的：檢測3種牽引力對幼犬腭橫縫區(qū)骨堿性磷酸酶影響，定量分析成骨

7、細胞活性。 方法：動物分組及手術植入牽引器同第一部分，分別于牽引5、10、15、20、30、40天切取一側腭橫縫組織，剔除軟組織后勻槳，4000rpm，4℃離心，分光光度儀半定量分析腭橫縫組織中堿性磷酸酶含量。 結果：各實驗組堿性磷酸酶含量增高明顯，A組：14.01±4.84 U/gprot；B組：14.2±4.78U/gprot：C組：15.63±10.22U/gprot；空白對照組：7.47±0.09U/gprot。

8、統(tǒng)計分析顯示差異有顯著性(p＜0.01)。 結論：牽引力可有效提高堿性磷酸酶含量，增強成骨細胞活性。其中以C組最為顯著，但牽引后期堿性磷酸酶含量下降幅度也最大。我們推測既可有效擴張腭橫縫又不損傷周圍組織的較佳作用力是1200g力。 第四部分、幼犬腭橫縫牽引BMP-2、-4、-7的表達 目的：了解縫牽引成骨中不同牽引力作用下骨形成蛋白-2、-4、-7的表達。 方法：標本取用第一部分的石蠟切片標本，采用SAB

9、C法作免疫組織化學研究，Olympus顯微鏡觀察攝片，Image-pro plus軟件測量單位面積陽性染色細胞累積光密度值(10D)。 結果：骨形成蛋白-2、-4、-7陽性染色呈棕黃色，分布在細胞胞漿內，主要定位于縫兩側骨基質邊緣的成骨細胞、間充質細胞、成纖維細胞、埋入新骨基質中的骨細胞。牽引初期骨形成蛋白-2、-4表達水平增強，以C組最明顯，B組次之，A組最弱。10天后開始下降，超過15天A、B兩組陽性表達再次升高，C組30天