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文檔簡介
1、第一部分黃芩苷對癲癇持續(xù)狀態(tài)后小鼠海馬組織的保護作用
目的:探討黃芩苷(Baicalin,BCL)對通過側(cè)腦室注入海人酸(kainic acid,KA)誘發(fā)癲癇持續(xù)狀態(tài)(status epilepticus,SE)小鼠的海馬組織的保護作用。
方法:將22-28g ICR雄性小鼠18只按照隨機分配原則分為對照組、癲癇持續(xù)狀態(tài)組和黃芩苷治療組(100mg/kg),共3個組,各組6只。采用在立體定位儀上向側(cè)腦室內(nèi)以0.1μ
2、g/5μl的濃度注入海人酸0.1μg建立小鼠SE模型。模型制作成功后,對黃芩苷治療組的癲癇小鼠以100mg/kg的劑量腹腔注射黃芩苷1次,12h后以相同劑量重復(fù)注射黃芩苷1次,對照組和SE組在相同時間點給與腹腔注射等量的生理鹽水。于制模24h后,取小鼠腦組織行常規(guī)石蠟包埋切片,通過HE染色觀察小鼠海馬組織的病理形態(tài)學(xué)變化。
結(jié)果:HE染色可見對照組海馬CA3區(qū)細胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)均正常;SE組細胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)均發(fā)生紊亂,細胞核明顯固縮
3、、核仁變小甚至消失,胞漿體積增大,有些呈透明化;黃芩苷治療組可見細胞形態(tài)及結(jié)構(gòu)介于對照組和SE組之間。
結(jié)論:黃芩苷能夠減輕小鼠癲癇后海馬神經(jīng)細胞的損傷,起到神經(jīng)保護作用。
第二部分黃芩苷對海人酸致癇小鼠海馬組織HO-1和NQO1表達的影響
目的:研究黃芩苷對通過側(cè)腦室注入海人酸誘發(fā)癲癇持續(xù)狀態(tài)小鼠的海馬組織中HO-1、NQO1蛋白表達的影響,以探討黃芩苷保護小鼠SE后海馬神經(jīng)的可能機制。
方法:
4、將22-28g ICR雄性小鼠45只隨機分為對照組、癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)組和黃芩苷治療組(100mg/kg)共3個組,每組15只。采用在立體定位儀上向側(cè)腦室內(nèi)注入海人酸0.1μg(0.1μg/5μl)的方法建立小鼠SE模型。模型制作成功后,對黃芩苷治療組的癲癇小鼠以100mg/kg的劑量腹腔注射黃芩苷1次,12h后以相同劑量重復(fù)注射黃芩苷1次,對照組和SE組在相同時間點給與腹腔注射等量的生理鹽水。于制模24h后,各組取5只小鼠腦組織行石
5、蠟包埋切片,通過免疫組化檢測血紅素加氧酶1(HO-1)和NAD(P)H:醌氧化還原酶1(NQO1)陽性細胞的表達情況;各組另外10只小鼠取海馬組織,通過Western blot檢測HO-1和NQO1蛋白的表達量。
結(jié)果:①制模24小時后,免疫組化結(jié)果顯示對照組海馬CA3區(qū)僅有少量散亂分布的淺黃色HO-1和NQO1陽性細胞,而SE組則可見大量排列紊亂、結(jié)構(gòu)異常的棕黃色HO-1和NQO1陽性細胞(P<0.05)。與SE組相比,黃芩
6、苷治療組中HO-1和NQO1陽性細胞呈棕褐色,數(shù)量更多,排列更緊密,二者差異明顯(P<0.05)。②Western blot結(jié)果顯示,對照組海馬組織HO-1和NQO1蛋白僅有少量表達,癲癇發(fā)作后的SE組中海馬組織HO-1和NQO1蛋白量顯著增加(P<0.05)。與SE組相比,黃芩苷治療組海馬組織中HO-1和NQO1蛋白的表達量則進一步上調(diào)(P<0.05)。
結(jié)論:小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)后海馬組織中 HO-1和NQO1蛋白表達上調(diào),可
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