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文檔簡介
1、目的:通過觀察堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)對豚鼠放射性損傷側(cè)中耳粘膜的病理和超微結(jié)構(gòu)變化的影響,探討bFGF對中耳放射性損傷有無保護作用及其作用機制。 方法:選用瀘州醫(yī)學(xué)院動物實驗中心提供的標準清潔級成年白色紅目雄性豚鼠44只,健康,體重300~350g,3月齡;耳廓preyer反射敏感,耳鏡檢查外耳道皮膚無紅腫,鼓膜完整、無充血,無中耳炎及上呼吸道感染跡象。隨
2、機分為正常對照組(4只)、模型對照1天組(10只)、模型對照30天組(10只)、bFGF1天組(10只)、bFGF30天組(10只)共5組。bFGF組在每次照射前30min按800U/kg的劑量經(jīng)腹腔內(nèi)注射bFGF,模型對照組在每次照射前30min經(jīng)腹腔內(nèi)注射同等體積生理鹽水,用1%戊巴比妥鈉按40mg/kg的劑量經(jīng)腹腔內(nèi)注射麻醉豚鼠。用產(chǎn)生6MV-X線(時間劑量率300cGy/min)的醫(yī)用直線加速器制造中耳放射性損傷模型,劑量為30
3、0cGy/次,每周5次,連續(xù)3周,總劑量(total dose,DT)45Gy。分別于照射完后次日處死模型對照1天組和bFGFl天組及正常對照組豚鼠,于30天后處死模型對照30天組和bFGF30天組豚鼠。所有動物均經(jīng)腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉后,斷頭處死。正常對照組取雙側(cè)耳,其余組取照射側(cè)耳作標本。在解剖顯微鏡下觀察外耳道有無分泌物、鼓膜有無穿孔及鼓室有無積液。并取下鼓室內(nèi)粘膜及咽鼓管(eustachian tube,ET),作病理切片觀察
4、中耳粘膜的病理改變情況及掃描電鏡觀察中耳粘膜纖毛損傷程度,并用醫(yī)學(xué)圖像分析軟件測量咽鼓管、鼓室前壁(tympanic cavity nterior wall,TCAW)、鼓岬(promontorium tympani,PT)粘膜的厚度,以及記數(shù)白細胞浸潤數(shù)。計量資料采用均數(shù)士標準差(x±s)表示,多組間比較用方差分析,用SPSS統(tǒng)計軟件包進行分析,規(guī)定P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果: 1.中耳標本大體觀察:①模型對照
5、1天組:外耳道紅腫,但鼓膜均完整,中耳粘膜充血、水腫明顯,2只出現(xiàn)鼓室積液。模型對照30天組:鼓膜完整,中耳粘膜充血、水腫,3只出現(xiàn)鼓室積液。②bFGF 1天組及30天組:鼓膜均完整,僅見中耳粘膜稍充血、水腫,未見鼓室積液、積膿 2.病理切片觀察結(jié)果: ①模型對照1天組:中耳粘膜上皮脫落,纖毛減少,粘膜下充血、水腫及白細胞浸潤明顯,杯狀細胞明顯增多,伴少量纖維母細胞增生。模型對照30天組:粘膜不完整,纖毛減少,充血、水腫
6、及白細胞浸潤減輕,纖維母細胞明顯增生。 ②bFGF1天組:中耳粘膜上皮完整,纖毛稍有減少,粘膜下輕度充血、水腫,少量白細胞浸潤。bFGF30天組:粘膜較完整,纖毛稍有減少,未見充血、水腫、炎細胞浸潤及纖維母細胞增生。 3.掃描電鏡觀察結(jié)果: ①模型對照1天組:粘膜上皮纖毛粘連聚集成團、倒伏、方向紊亂,纖毛上有散在的分泌空泡。模型對照30天組:粘膜纖毛大片脫落,殘留纖毛廣泛粘連、倒伏嚴重、方向凌亂、結(jié)構(gòu)不清。
7、 ②bFGF1天及30天組:粘膜上皮纖毛方向基本一致,僅尖端有輕微倒伏、粘連。 4.中耳粘膜厚度改變結(jié)果: ①bFGF1天組與模型對照1天組比較:咽鼓管、鼓室前壁、鼓岬的粘膜厚度明顯較薄,P值均<0.01,差異極顯著。 ②模型對照30天組與模型對照1天組比較:咽鼓管、鼓室前壁、鼓岬的中耳粘膜厚度明顯變薄,P值均<0.05,差異有顯著性。 ③bFGF30天組與模型對照30天組比較:咽鼓管、鼓室前壁、鼓岬的
8、粘膜厚度明顯較薄,P值均<0.01,差異極顯著。 ④bFGF30天組與bFGF1天組比較:咽鼓管、鼓室前壁、鼓岬的中耳粘膜厚度明顯變薄,P值均<0.05,差異有顯著性。 ⑤bFGF 30天組與正常對照組比較:咽鼓管、鼓室前壁、鼓岬粘膜厚度明顯變厚,P值均<0.01,差異極顯著。 5.中耳粘膜白細胞浸潤情況: ①bFGF1天組與模型對照1天組比較:咽鼓管、鼓室前壁、鼓岬的白細胞浸潤明顯減少,P值均<0.01
9、,差異極顯著。 ②模型對照30天組與模型對照1天組比較:咽鼓管、鼓室前壁、鼓岬的白細胞浸潤明顯減少,P值均<0.05,差異有顯著性。 ③bFGF30天組與模型對照30天組比較:咽鼓管、鼓室前壁、鼓岬的白細胞浸潤明顯減少,P值均<0.01,差異極顯著。 ④bFGF30天組與bFGF1天組比較:咽鼓管、鼓室前壁、鼓岬的白細胞浸潤明顯減少,P值均<0.05,差異有顯著性。 ⑤bFGF30天組與正常對照組比較:咽
10、鼓管、鼓室前壁、鼓岬白細胞浸潤明顯增多,P值均<0.01,差異極顯著。 結(jié)論: 1.應(yīng)用醫(yī)用直線加速器總照射劑量達到45Gy時即可造成中耳的放射性損傷模型,中耳粘膜的放射性損傷是由電離輻射的原發(fā)作用和繼發(fā)作用及由此所致的咽鼓管功能障礙共同作用所致。 2.bFGF能明顯減輕電離輻射對中耳粘膜的損傷,減輕炎癥反應(yīng),抑制纖維化,保護中耳功能。 3.bFGF對中耳放射性損傷防護作用的機理,可能與其促血管生成、抵抗
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