糖芯片的制備及其與蛋白質的相互作用研究.pdf

1、蛋白質與糖的相互作用是許多重要的生物過程的基礎，如細胞粘附、細胞遷移和信號傳導等，這些生物過程負責調控細胞和生物機體的生理功能。不僅如此，這些作用還與疾病的發(fā)生密切相關，如腫瘤細胞表面會發(fā)生異常的糖基化反應，細胞黏附是寄生蟲、真菌、細菌以及病毒入侵宿主細胞的前提。因此，深入了解蛋白質與糖的相互作用的機制以及尋找能夠抑制它們之間的相互作用的化合物(如抗體和小分子配體)對了解生命過程和治療疾病至關重要。糖芯片在糖組學研究、藥物開發(fā)和臨床診斷

2、等方面有著重要的應用前景，因此備受關注。為此，本論文選定糖芯片為研究對象，系統地研究了糖芯片的制備及其在蛋白質與糖的相互作用研究中的應用。主要工作包括： 1.概述了糖芯片的研究進展； 2.概述了蛋白質與糖相互作用的研究進展； 3.建立了一種新的非共價類型的糖芯片的制備方法，并研究了其在蛋白質與糖的相互作用中的應用。合成了三苯甲基糖衍生物，以96孔聚苯乙烯微孔板為固相載體，將合成的三苯甲基糖衍生物作為探針通過非共價

3、作用(疏水作用為主)固定到96孔板表面，采用熒光標記的凝集素與探針雜交，研究制備的糖芯片在蛋白質與糖的相互作用研究中的應用，并且優(yōu)化了凝集素與糖芯片的雜交條件。結果表明，三苯甲基糖衍生物能夠穩(wěn)定地結合在微孔板表面而不被洗脫，凝集素能夠識別被固定的糖類化合物，證明制備的糖芯片能用于蛋白質對糖的識別作用的研究；通過研究小分子糖化合物的抑制作用，表明糖芯片可以用于蛋白質與糖的相互作用的抑制劑的篩選。 　　4.建立了一種新的共價類型的糖芯片的

4、制備方法，并研究了其在蛋白質與糖的相互作用中的應用。以96孔聚苯乙烯微孔板為固相載體，在其表面鋪上一層凝膠，將凝膠活化，優(yōu)化固相化學反應條件，通過共價鍵將未經過化學修飾的單糖和二糖固定到96孔板表面，加入熒光標記的凝集素進行雜交，研究此類的糖芯片在蛋白質與糖的相互作用研究中的應用。結果表明，凝集素能夠識別被固定的單糖和二糖，證明制備的糖芯片能用于蛋白質對糖的識別作用的研究；通過研究小分子糖化合物的抑制作用，表明糖芯片可以用于蛋白質與糖的