胞外pH值梯度改變對大鼠冠狀動脈環(huán)張力的影響及機制探討.pdf

1、實驗目的：觀察細胞外pH值梯度改變(pH7.4~6.4，7.4~8.4)對大鼠冠狀動脈環(huán)張力的影響并探討其機制。
　　實驗方法：大鼠斷頭處死后迅速分離出冠狀動脈，并固定于離體微動脈環(huán)張力測定儀的換能器上，使用PowerLab記錄冠狀動脈環(huán)張力變化。觀察pH值梯度降低（pH=7.4，7.2，7.0，6.8，6.6，6.4）對大鼠冠脈環(huán)張力的影響；觀察pH值梯度升高（pH=7.4，7.6，7.8，8.0，8.2，8.4）對大鼠冠脈環(huán)張

2、力的影響；孵育工具藥物NPPB，AM，KB-R7943，LaCl3，L-NAME和改變浴液鈣離子以探究氯通道，Na+/H+交換，Na+/Ca2+交換，Ca2+通道，一氧化氮，及外鈣內流內鈣釋放是否參與前述改變。
　　實驗結果：
　　1、靜息狀態(tài)下，大鼠冠狀動脈環(huán)的基礎張力隨細胞外環(huán)境pH值的梯度降低(pH7.4~6.4)而逐漸升高。偏酸性環(huán)境下（pH值=7.2，7.0，6.8，6.6，6.4時）冠狀動脈環(huán)的張力分別為（0.0

3、4±0.01）mN，（0.29±0.05）mN，（2.71±0.34）mN，（2.72±0.37）mN，（2.66±0.41）mN。為此我們選定pH值為6.8來研究偏酸性環(huán)境下大鼠冠狀動脈環(huán)收縮的機制。
　　2、靜息狀態(tài)下，pH值梯度升高(pH7.4~8.4)對大鼠冠狀動脈環(huán)的基礎張力無影響。偏堿性環(huán)境下（pH值=7.6，7.8，8.0，8.2，8.4時）冠狀動脈環(huán)的張力分別為（0.03±0.01）mN，（0.07±0.01）mN

4、，（0.09±0.03）mN，（0.13±0.02）mN，（0.15±0.02）mN。
　　3、孵育3×10-2mmol/l的NPPB可以顯著減弱酸性環(huán)境誘導的大鼠冠狀動脈環(huán)收縮，冠狀動脈環(huán)的張力分別為（2.99±0.42）mNVS（1.07±0.12）mN，P=0.001。
　　4、孵育3×10-2mmol/l的AM可以顯著減弱酸性環(huán)境誘導的大鼠冠狀動脈環(huán)收縮，冠狀動脈環(huán)的張力分別為（2.77±0.47）mNVS（2.13

5、±0.35）mN，P=0.026。
　　5、孵育1×10-2mmol/l的KB-R7943可以顯著減弱酸性環(huán)境誘導的大鼠冠狀動脈環(huán)收縮，冠狀動脈環(huán)的張力分別為（2.59±0.53）VS（1.04±0.14）mN，P=0.001。
　　6、孵育5mmol/l的LaCl3可以顯著減弱酸性環(huán)境誘導的大鼠冠狀動脈環(huán)收縮，冠狀動脈環(huán)的張力分別為（2.89±0.65）mNVS（0.11±0.02）mN，P=0.001。
　　7、孵

6、育0.1mmol/l的L-NAME可以顯著增強酸性環(huán)境誘導的大鼠冠狀動脈環(huán)收縮，冠狀動脈環(huán)的張力分別為（2.75±0.22）mNVS（4.17±1.06）mN，P=0.02。
　　8、浴液中無鈣（Ca2+-free）時，酸性環(huán)境輕僅微收縮大鼠冠狀動脈環(huán)，冠狀動脈環(huán)的張力為（2.55±0.29）mNVS（0.21±0.02）mN，P=0.001；浴液鈣離子正常（2.5mM）時，恢復了酸性環(huán)境對大鼠冠狀動脈環(huán)的收縮，（2.3±0.31