SLE血清中的IFN-α和IL-6對造血干細(xì)胞定向分化為樹突狀細(xì)胞的影響.pdf

1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic Lupus Erythematosus，SLE)是一種典型的自身免疫性疾病，以體內(nèi)B細(xì)胞的高度活化和大量自身抗體的產(chǎn)生為免疫學(xué)特征，發(fā)病機(jī)制迄今不明。樹突狀細(xì)胞(Dendritic cells， DC)是目前所知功能最強(qiáng)大的抗原提呈細(xì)胞(Antigen presenting cell， APC)，具有調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和免疫耐受的雙重作用，其功能狀態(tài)與體內(nèi)自身反應(yīng)性T、B細(xì)胞的活化密切相關(guān)，可能在SLE的發(fā)病

2、中起重要作用。已有研究表明SLE患者的DC存在數(shù)量、表型和功能的異常，但其中的機(jī)制并不明了。SLE血清中細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)失調(diào)，多種具有免疫調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子表達(dá)異常，它們都有可能影響樹突狀細(xì)胞分化發(fā)育的過程。有研究報(bào)道，SLE患者體內(nèi)高表達(dá)的IFN-α可誘導(dǎo)單核細(xì)胞向DC異常分化發(fā)育成熟，遞呈自身抗原，誘導(dǎo)自身反應(yīng)性T細(xì)胞活化。然而，體內(nèi)DC的來源有多種，造血干細(xì)胞也是其重要來源之一。此外，SLE血清中還存在其他許多異常表達(dá)的細(xì)胞因子，都可

3、能對DC的分化發(fā)育過程產(chǎn)生影響。為此，本文旨在探討SLE血清中的IFN-α對造血干細(xì)胞定向分化為DC的影響，并進(jìn)一步研究SLE血清中的IL-6在DC分化發(fā)育過程中的作用。 我們首先收集SLE患者和正常人血清，用ELISA法檢測SLE血清中最常見、最可能起致病作用的細(xì)胞因子IFN-α、IL-6和IL-10的表達(dá)水平，并分析其表達(dá)水平與疾病活動(dòng)度SLEDAI評分、相關(guān)免疫學(xué)指標(biāo)(如血清抗dsDNA抗體和補(bǔ)體C3、C4水平)的相關(guān)性。

4、然后，用GM-CSF+IL-4+TNF-α方案在體外誘導(dǎo)磁珠分選的臍血CD34<'+>造血干細(xì)胞定向分化為樹突狀細(xì)胞，并在培養(yǎng)過程中分別加入IFN-α單獨(dú)升高、IL-6單獨(dú)升高以及IFN-α、IL-6同時(shí)升高的SLE血清，用以分析血清細(xì)胞因子對DC分化發(fā)育及其功能狀態(tài)的影響；運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測DC的表型，ELISA法檢測DC分泌細(xì)胞因子的水平，CCK-8法分析DC刺激同種異體T細(xì)胞增殖的能力，ELISA法和流式細(xì)胞術(shù)檢測DC對T細(xì)胞亞群

5、分化影響，以觀察SLE血清中的IFN-α和IL-6對造血干細(xì)胞定向分化發(fā)育為DC的異常影響。研究結(jié)果表明SLE患者血清中IFN-α、IL-6和IL-10的水平均顯著升高，并與疾病活動(dòng)度SLEDAI評分呈正相關(guān)，SLE血清中的IFN-α和IL-10的水平還與抗dsDNA抗體水平呈正相關(guān)，與補(bǔ)體C3水平呈負(fù)相關(guān)。SLE血清中異常升高的IFN-α和IL-6均可促進(jìn)DC表面MHC-Ⅱ類分子HLA-DR和共刺激分子CD80、CD86的表達(dá)，增強(qiáng)其

6、刺激同種異體T細(xì)胞增殖的能力，降低其分泌IL-12的水平；在對DC刺激T細(xì)胞亞群分化的影響上，IFN-α和IL-6卻發(fā)揮了不同的作用，IFN-α參與誘導(dǎo)的DC促進(jìn)了CD3<'+>CD8<'->IFN-γ<'+> Th1細(xì)胞亞群和CD3<'+>CD8<'+>IFN-γ<'+>Tc1細(xì)胞亞群的分化以及Th1型細(xì)胞因子IFN-γ的產(chǎn)生，而IL-6參與誘導(dǎo)的DC則抑制了IFN-γ的產(chǎn)生，并存在抑制Th1和Tc1細(xì)胞分化的趨勢；此外，當(dāng)SLE血清

7、中出現(xiàn)IFN-α和IL-6同時(shí)升高時(shí)，IFN-α與IL-6發(fā)揮相似的作用，促進(jìn)DC的表型成熟，增強(qiáng)其刺激T細(xì)胞增殖的能力，抑制其分泌IL-12，但兩者并未顯示協(xié)同或疊加效應(yīng)；關(guān)于IFN-α和IL-6在對所誘導(dǎo)的DC刺激T細(xì)胞亞群分化中的相互作用，則顯示IFN-α可拮抗IL-6的效應(yīng)，使其所誘導(dǎo)的DC刺激T細(xì)胞亞群分化時(shí)表現(xiàn)為Th1和Tc1細(xì)胞增多和IFN-γ水平升高的趨勢。綜合上述，本研究顯示SLE血清中顯著升高的IFN-α和IL-6對