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文檔簡介
1、過氧化氫酶是一種重要的抗氧化酶,對羥基自由基、超氧陰離子等自由基具有較好的清除能力。本論文以殼聚糖固定化過氧化氫酶提高過氧化氫酶的穩(wěn)定性及其在卷煙濾嘴生產(chǎn)中添加的可操作性,從而達(dá)到以過氧化氫酶清除卷煙煙氣中自由基的目的。主要的研究內(nèi)容與結(jié)果如下: 1.確定了殼聚糖固定化過氧化氫酶的固定化方案,對固定化過程進(jìn)行了優(yōu)化。固定化的最優(yōu)條件為:酶液(過氧化氫酶酶活2×104CIU/ml):3%殼聚糖溶液:交聯(lián)劑=6∶20∶100(v∶v
2、∶v),乙二醛濃度6%(w/v),吸附時間0.5h,交聯(lián)時間2.5h。 2.對固定化過氧化氫酶的性質(zhì)進(jìn)行了初步的研究:紅外分析結(jié)果說明過氧化氫酶完成了交聯(lián)反應(yīng);固定化過氧化氫酶的米氏常數(shù)Km從游離酶的30.3mmol/L增加到61.7mmol/L,固定化酶對過氧化氫的親和性明顯下降;最適pH值為7.0,且在5-9范圍均保持較高的酶活;其熱穩(wěn)定性和貯藏穩(wěn)定性均得到了提高。 3.以紫外光-TiO2催化自由基產(chǎn)生體系初步考察了
3、過氧化氫酶清除自由基的能力?;钚赃^氧化氫酶對紫外光-TiO2催化體系產(chǎn)生的自由基幾乎能完全清除,而熱滅活的過氧化氫酶對此體系的自由基幾乎不能清除。說明只有具有活性的過氧化氫酶具有清除自由基的能力。 4.固定化過氧化氫酶對鄰苯三酚體系產(chǎn)生的自由基同樣有清除作用,9ml0.2mmol/L鄰苯三酚溶液中,當(dāng)加入固定化過氧化氫酶0.08g時,對其自氧化達(dá)到50%抑制。 5.以殼聚糖固定化過氧化氫酶為一種卷煙濾嘴添加劑,研究其去除
4、主流煙氣中自由基的效果。當(dāng)濾嘴中固定化過氧化氫酶添加量分別是10、30、50mg/支時,氣相自由基分別減少了6.5%、9.9%和15.1%;固相自由基分別減少2.3%、21.9%和40.8%。 6.采用機(jī)械干法添加的方式可以提高固定化過氧化氫酶對自由基的清除效率。10mg/支的機(jī)械干法添加的清除自由基效果為:氣相自由基下降35%,固相自由基下降22.4%。 7.考察了殼聚糖固定化過氧化氫酶對卷煙中其他有害物質(zhì)的去除效果,
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