稻瘟病菌Cdc42與Chm1關(guān)系初探.pdf

1、Cdc42是Rho族蛋白(也稱為Rho GTP酶)最主要成員之一，在真菌的生長發(fā)育、極性生長及侵染致病過程中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。PAK激酶作為Cdc42和Rac等Rho GTP酶下游的效應(yīng)因子，參與了細(xì)胞骨架重組的各個方面。稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)是研究絲狀真菌的重要模式生物。該菌的侵染循環(huán)涉及復(fù)雜的細(xì)胞分化過程，以應(yīng)對宿主的防衛(wèi)機(jī)制。我們推測MgCdc42與該菌中PAK激酶Chml(或Mst20)間的信號傳導(dǎo)對這

2、一過程起到調(diào)控作用。本研究中，我們初步明確了稻瘟病菌中Cdc42與Chm1間的關(guān)系。首先通過RT-PCR分析發(fā)現(xiàn)MgCdc42在Chm1的上游起作用，同時酵母雙雜交實驗表明Chm1通過其PBD結(jié)構(gòu)域與MgCdc42直接互作。此外，我們將PBD結(jié)構(gòu)域缺失的Chm1分別轉(zhuǎn)入野生型菌株、MgCdc42插入失活突變體和Chm1插入失活突變體中。觀察發(fā)現(xiàn)，在野生型菌株Guy11中表達(dá)PBD結(jié)構(gòu)域敲除的Chm1，對稻瘟病菌的生長發(fā)育和侵染致病能力的

3、影響不大；在MgCdc42插入失活突變體中表達(dá)PBD結(jié)構(gòu)域敲除的Chm1，可以恢復(fù)分生孢子的形態(tài)，但附著胞形成仍受到抑制；而在Chml插入失活突變體中表達(dá)PBD結(jié)構(gòu)域敲除的Chm1，其產(chǎn)孢量、分生孢子形態(tài)和菌絲形態(tài)等都得到恢復(fù)，但侵染能力仍有所下降。這些結(jié)果表明MgCdc42與Chml在稻瘟病菌中具有密切的功能相關(guān)性，組成一條MgCdc42-Chm1信號通路調(diào)控稻瘟病菌分生孢子形態(tài)等極性生長發(fā)育過程，而且Chm1并不是MgCdc42下游