牙周膜成纖維細胞彈性模量與內毒素作用關系的初步研究.pdf

1、背景與目的:牙周病是指發(fā)生在牙齒支持組織(包括牙齦、牙周膜、牙槽骨、牙骨質)的慢性、非特異性、感染性疾病。其最大的危害是導致罹患牙齒的松動脫落,從而引起發(fā)音、功能和面部形態(tài)變化。人牙周膜成纖維細胞(human perio dontal ligament cell,hPDLC)是牙周組織的主要細胞,為力學敏感細胞,在牙周組織的修復改建中起很重要的作用?；罴毎哂袃仍诘牧W性質,能夠響應外界環(huán)境的變化,通過改變自身的力學性質來調節(jié)相應的生物

2、過程中的狀態(tài)。細胞彈性模量是反映細胞生物力學性質的重要參數(shù),與細胞的移動、分化、凋亡有密切的聯(lián)系。內毒素是革蘭陰性菌細胞壁外膜中的脂多糖(lipo poly saccharide,LPS)成分,是牙周病的重要病因之一。早期關于內毒素對牙周膜成纖維細胞的影響,多集中于內毒素刺激牙周膜成纖維細胞后細胞因子的變化,關于內毒素對hPDLC的力學性質是否產生影響,未見文獻報道。本課題采用原子力顯微鏡初步觀察牙周膜成纖維細胞經LPS作用后的彈性模量

3、變化,以期對LPS在牙周炎的致病機理有進一步認識。
　　方法:采用酶消化組織塊法獲取原代hPDLC,取第5-8代hPDLC用于實驗;利用AFM接觸模式對hPDLC進行掃描成像,獲取hPDLC的超微結構圖像;實驗分為正常培養(yǎng)組、0.1ug/mlLPS刺激組、1ug/mlLPS刺激組、10ug/mlLPS刺激組;各實驗組正常培養(yǎng)后加入含相應濃度LPS的細胞培養(yǎng)液刺激細胞24小時,采用10μm左右微球修飾的原子力顯微鏡探針,通過AFM獲

4、取各組hPDLC細胞核相對應區(qū)域的力曲線,借助赫茲模型計算細胞彈性模量,通過方差分析比較各組間的差異。
　　結果:對照組、0.1μg/ml的LPS刺激組、1μg/ml的LPS刺激組、10μg/ml的LPS刺激組hPDLC彈性模量依次為1.958±0.922KPa、1.448±0.999、2.477±1.656KPa、3.654±1.926KPa。統(tǒng)計學分析顯示,與對照組相比,0.1μg/ml的LPS刺激組細胞彈性模量明顯降低,1μ