大黃及谷氨酰胺對腸缺血再灌注大鼠腸道保護(hù)作用及其機(jī)理研究.pdf

1、【目的】通過阻斷腸系膜上動脈(super mesenteric artery，SMA)建立大鼠腸道缺血再灌注(ischemia reperfusion，I／R)損傷模型，觀察腸道形態(tài)學(xué)變化、腸道通透性改變和腸道細(xì)菌移位情況，觀察大黃及谷氨酰胺(glutamine，Gln)對I/R損傷腸道的保護(hù)作用，并探討其可能的作用機(jī)理，為臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。 【材料與方法】 雄性SD大鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為：大黃組(經(jīng)

2、阻斷SMA血流30min后再恢復(fù)血流建立腸道I/R大鼠模型，術(shù)后第1～5天每天大黃液灌胃)；Gin組(建立腸道I／R模型，術(shù)后第1～5天每天Gin灌胃)；合用組(建立腸道I／R模型，術(shù)后第l～5天每天Gln大黃混合液灌胃)；對照組(建立腸道I／R模型，術(shù)后第1～5天每天等量生理鹽水灌胃)；偽手術(shù)組(分離SMA但不阻斷，30min后關(guān)腹，術(shù)后自由進(jìn)食進(jìn)水，術(shù)后第1～5天每天等量生理鹽水灌胃)。前四組術(shù)后第1～5天行持續(xù)全腸道外營養(yǎng)(tot

3、al parenteral nutrition，TPN)。術(shù)后第5天經(jīng)口灌胃乳果糖+甘露醇混合液收集24小時尿液，高壓液相色譜儀(HPLC)測定乳果糖／甘露醇比率(lactulose／mannitol，L／M)。術(shù)后第6天采集門靜脈血2mL，PCR擴(kuò)增技術(shù)檢測細(xì)菌核糖體小亞基RNA(16s ribosoma RNA，16srRNA)基因；處死大鼠，取適量胰腺組織和腸系膜淋巴結(jié)(mesenteric lymph node，MLN)行細(xì)菌學(xué)

4、培養(yǎng)；取空腸10厘米光鏡下觀察小腸絨毛高度、黏膜厚度及全層厚度的變化；留取回腸10厘米免疫印跡法檢測熱休克蛋白70(heat shock protein 70，HSP70)含量。 【結(jié)果】 1．尿液L／M:偽手術(shù)組比較，對照組L／M明顯增大(p<0.005)，大黃組、Gln組及合用組則與偽手術(shù)組相似，Gln組L／M小于大黃組，但無顯著性差異； 2門靜脈血細(xì)菌16s rRNA基因：偽手術(shù)組門靜脈血16s rRNA基因陽性率

5、低于對照組(p<0.01)，大黃組和合用組亦低于對照組(p<0.05)，Gln組陽性率雖低于對照組，但無統(tǒng)計學(xué)意義；相關(guān)分析示16s rRNA基因陽性率與L／M有良好的相關(guān)性(p<0.01)；3．細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)：偽手術(shù)組培養(yǎng)陽性率明顯低于對照組(p<0.005)，大黃組陽性率低于對照組(p<0.01)，GIn組和合用組陽性率亦低于對照組(p<0.05)；相關(guān)分析示培養(yǎng)陽性率與L/M無明顯相關(guān)性；4．小腸形態(tài)學(xué)：對照組小腸絨毛高度，黏膜厚度顯

6、著低于偽手術(shù)組(p<0.005)，大黃組和合用組小腸絨毛高度與偽手術(shù)組相似，GIn組絨毛高度亦高于對照組(p<0.01)，合用組絨毛高度高于GIn組(p<0.05)；大黃組和GIn組黏膜厚度大于對照組(p<0.05)，合用組黏膜厚度明顯大于對照組(p<0.01)；小腸全層厚度各組間無顯著性差異；5．小腸 HSP70 含量：對照組小腸熱休克蛋白 70 含量顯著低于偽手術(shù)組(p<0.005)，GIn組則與偽手術(shù)組相似(p>0.05)，大黃組