黃蜀葵花總黃酮預(yù)處理的腦缺血保護作用及作用機理.pdf

1、缺血預(yù)處理(Ischemic preconditioning，IP)是指預(yù)先短暫性缺血或輕度缺氧后激發(fā)或動員機體內(nèi)在的防護能力，使機體對隨后嚴(yán)重的缺血、缺氧產(chǎn)生防御和保護現(xiàn)象。而藥物預(yù)處理(pharmacological preconditioning，PP)是通過藥物模擬缺血預(yù)處理激發(fā)機體內(nèi)源性物質(zhì)，如腺苷、NMBA受體阻斷劑等而發(fā)揮保護作用。PP的研究開辟了腦保護研究的一個新領(lǐng)域。黃蜀葵花總黃酮(total flavones ofA

2、belmoschl Manihot，TFA)是錦葵屬植物黃蜀葵的花中提取的有效部位。本室曾發(fā)現(xiàn)TFA藥理性預(yù)處理(pharmacological preconditioning of TFA，PPA)對大鼠心肌缺血再灌注損傷有保護作用，但未見PPA對腦缺血再灌注損傷影響的研究報道，因此，本研究就PPA對腦缺血再灌注損傷的影響及其機制進行了初步研究。主要研究結(jié)果如下： 1．PPA早期相對大鼠腦缺血再灌注損傷的影響PPA(20，40

3、，80，160 mg·kg<'-1>)3Gmin對大鼠MCAO 9Cmin致缺血后腦梗死體積百分比增高有明顯的抑制作用，可不同程度的降低血清中乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase,LDH)的活性、丙二醛(methylenedioxyamphetamine，MDA)、前列腺素 E<,2>(Prostaglandin E<,2>，PGE<,2>)的含量，同時升高一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS

4、)的活力及血清中一氧化氮(nitric oxide，NO)的含量。 2．PPA中間時相預(yù)處理對大鼠腦缺血再灌注損傷的影響PPA(80，160 mg·kg<'-1>)7h對大鼠MCAO 90min致腦梗死體積百分比增高無明顯的影響。 3．PPA延遲相預(yù)處理對大鼠腦缺血再灌注損傷的影響PPA(20，40，80，160 mg·kg<'-1>)36h對大鼠MCAO 90min致缺血后腦梗死體積百分比增高有明顯的抑制作用，不同程度

5、的降低血清中LDH的活性，MDA的含量，同時升高血清中一氧化氮的含量，其中160 mg ·kg<'-1> PPA能顯著提高腦組織中iNOSmRNA的表達。 4．PPA對小鼠腦缺血再灌注損傷的影響小鼠PPA(25，50，100，200 mg·kg<'-1>)30min時對MCAO 90min致腦梗死體積百分比增高有明顯的抑制作用，不同程度的降低血清中LDH、小鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(nervous specific enolase，

6、NSE)的活性及MDA的含量，同時升高血清中NO的含量。 5．內(nèi)皮依賴性超級化因子(Endothelium-derived hyperpolarizing factor，EDHF)在海馬神經(jīng)元缺氧復(fù)氧損傷的作用海馬神經(jīng)元培養(yǎng)至第8天，加入乙酰膽堿(Acetylcholine，Ach)和一段3mm腦基底環(huán)動脈后后行缺氧4h復(fù)氧24h．結(jié)果表明Ach(1μmol·L-1)+血管明顯地抑制缺氧復(fù)氧后海馬神經(jīng)元活力的降低，同時能顯著降低

7、培養(yǎng)上清液中的LDH活性，但Aeh及血管段單獨均沒有作用。加入前列腺環(huán)素(PGI<,2>)合成酶抑制劑吲哚美辛(indomethacin，Indo)及NO合酶抑制劑左旋硝基精氨酸甲酯(Nω-nitro-L-arginine-methyl-ester,L-NAME)預(yù)處理對Ach合用血管的作用無明顯的影響，提示Ach介導(dǎo)的血管內(nèi)皮EDHF釋放對神經(jīng)細(xì)胞缺氧再給氧損傷有保護作用。 6．TFA對海馬神經(jīng)元缺氧復(fù)氧損傷的影響及可能的ED

8、HF機制與單獨應(yīng)用TFA比較，聯(lián)合使用 TFA(3，10，30，100mg/L)和血管對缺氧復(fù)氧后海馬神經(jīng)元的活力有明顯的升高作用，同時降低培養(yǎng)上清液中LDH的活性和海馬神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)的游離 Ca<'2+>的增高。加入Indo及L-NAME預(yù)處理對TFA的保護作用無明顯的影響，提示TFA對缺氧復(fù)氧致神經(jīng)細(xì)胞損傷有一定的保護作用，其機制可能與EDHF有關(guān)。 結(jié)論：TFA 藥理性預(yù)處理對腦缺血再灌注損傷有明顯的保護作用，其機制可能與減