兩種鉑類藥物對人胃癌細胞Livin和MDR1表達的影響.pdf

1、背景和目的：胃癌在我國的發(fā)病率高，進展期胃癌(AGC)的治療失敗原因多為化療的耐藥?；熌退幍臋C制包括多藥耐藥基因(MDR1)和凋亡缺陷等。凋亡抑制蛋白(IAP)家族因可能在凋亡缺陷中起重要作用而日益受到重視。Livin是這個家族的新成員，其與胃癌的治療預(yù)后關(guān)系等尚未闡明。MDR1與奧沙利鉑(L-OHP)的關(guān)系尚缺乏深入的研究。順鉑(CDDP)和L-OHP為治療胃癌的有效藥物，兩者的作用機制存在不同之處。 本實驗旨在研究：

2、 (1)CDDP和L-OHP對人胃癌細胞株BGC-823和SGC-7901生長的抑制作用； (2)Livin、 MDR1基因在鉑類作用后表達的變化； (3)探討兩種鉑類對于胃癌細胞不同的作用機理。 方法：(1)應(yīng)用MTT比色法檢測兩種鉑類(CDDP和L-OHP)對胃癌細胞株(BGC-823和SGC-7901)不同時間的增殖抑制率；(2)選擇不同濃度(IC10、IC30、IC50)的兩種鉑類藥物作用于BGC-8

3、23和SGC-7901細胞，采用RT-PCR法檢測Livin和MDR1基因表達量；(3)選擇三個時間段的IC30濃度的兩種鉑類藥物作用于BGC-823和SGC-7901細胞，采用Western-Blots法檢測Livin蛋白表達量；(4)選擇IC30濃度的兩種鉑類藥物作用于BGC-823和SGC-7901細胞后48 h，流式細胞分析(FCM)細胞凋亡；(5)選擇IC30濃度的兩種鉑類藥物作用于BGC-823和SGC-7901細胞后48

4、h，細胞劃痕實驗評價細胞遷移能力。 結(jié)果： (1)兩種鉑類藥物作用后，胃癌細胞BGC-823和SGC-7901的增殖受到抑制，呈時間和劑量依賴，L-OHP的量效變化更明顯。 (2)兩種鉑類藥物早期均可抑制低分化細胞BGC-823 Livin表達，CDDP作用細胞72 h后Livin表達量開始增加，而L-OHP組仍呈下降趨勢；對于中分化細胞SGC-7901，Livin總體表達量低，CDDP作用后，表達隨濃度增加和

5、時間延長有增長趨勢，L-OHP作用后，早期表達有所增加，72 h后表達下降。 (3)兩種鉑類藥物作用后，MDR1呈上升趨勢，隨著濃度增加和/或時間的延長，表達增強。 (4)兩種鉑類藥物作用下，BGC-823細胞的凋亡率增加高于SGC-7901細胞，L-OHP)組的細胞凋亡率高于CDDP組(P<0.05)。 (5)兩種鉑類藥物作用后，BGC-823細胞的增殖遷移較SGC-7901細胞慢而距離短，CDDP作用后細胞

6、的增殖遷移較L-OHP作用后快而距離長。 結(jié)論：(1)兩種鉑類藥物均抑制胃癌細胞的增殖，一定范圍內(nèi)增加L-OHP的量，可能會帶來更大的細胞毒作用。L-OHP誘導(dǎo)凋亡和抑制遷移侵襲的能力強于CDDP。 (2)L-OHP對胃癌細胞的Livin表達可能存在抑制作用，對耐藥性的延遲可能有一定作用。CDDP可能誘導(dǎo)了Livin的表達，Livin可能參與了胃癌細胞對CDDP的耐藥機制。 (3)兩種鉑類藥物作用后引起的增殖抑制