腦心通對急性缺血性腦組織神經(jīng)保護(hù)機(jī)制的研究.pdf

1、目的:腦梗死對人類的健康已然造成嚴(yán)重威脅，通過探討其病理生理學(xué)機(jī)制，來尋求有效治療是當(dāng)前慢病防治研究的重點(diǎn)之一。近幾年研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞凋亡是缺血后腦損傷的重要病理生理機(jī)制之一。調(diào)控腦缺血后凋亡相關(guān)基因已成為臨床治療新的靶點(diǎn)。大量的基礎(chǔ)體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)和臨床對照研究發(fā)現(xiàn)，腦心通(NXT)具有抗炎、抗氧化、抗凋亡等多種作用，因而，本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)在小鼠大腦中動脈閉塞(middlecerebralarteryocclusion，MCAO)所致局灶腦缺血模型

2、上，觀察腦心通對缺血急性期腦組織是否具有保護(hù)作用及其對局部腦缺血后大腦皮層Akt、CREB以及Bcl-2表達(dá)是否有影響。
　　方法:采用雄性成年CD-1小鼠，應(yīng)用改良Longa線栓法建立小鼠右側(cè)MCAO模型。實(shí)驗(yàn)動物隨機(jī)分為假手術(shù)組（Sham）、模型組(MCAO)、溶劑對照組(Vehicle)、腦心通小劑量組(MCAO+NXT360mg/kg，NXT-L)、腦心通大劑量組(MCAO+NXT540mg/kg，NXT-H)、抑制劑組(

3、MCAO+NXT540mg/kg+LY294002，NXT-LY)。術(shù)后24h對小鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評分、測定腦組織的含水量，測定腦梗死體積，應(yīng)用免疫組化、蛋白印記、實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)和免疫熒光共定位技術(shù)測定Akt、CREB和Bcl-2的表達(dá)。應(yīng)用PI3-K抑制劑LY294002觀察其對上述指標(biāo)表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:
　　模型組、溶劑對照組、腦心通組小鼠均出現(xiàn)左側(cè)肢體偏癱。腦心通大劑量組的神經(jīng)功能評分明顯低于溶劑對照組

4、（P＜0.05），腦心通小劑量組神經(jīng)功能評分減低，但與溶劑對照組相比無明顯差異。在腦缺血后24h，腦心通大劑量組與溶劑對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(35.28％±5.92％v.s.46.54％±4.24％，P＜0.05)。腦心通小劑量組與溶劑對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。正常組無梗死灶。腦心通大劑量組梗死體積比溶劑對照組明顯減小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(81.35％±1.75％vs.85.55％±0.93％,P＜0.05)。與溶劑對照組相比，腦心通小

5、劑量組梗死體積無明顯減小。
　　腦缺血24h后，模型組Akt、CREB及Bcl-2的活性形式表達(dá)較正常組減低(P＜0.05)。腦心通大劑量組p-Akt、p-CREB、Bcl-2蛋白及Akt、CREB、Bcl-2信使RNA表達(dá)升高，與溶劑對照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。腦心通小劑量組Akt、CREB及Bcl-2表達(dá)也升高，但與溶劑對照組相比，結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與腦心通大劑量組相比，抑制劑組p-Akt、p-CREB蛋白表達(dá)明顯

6、下降，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。抑制劑組Bcl-2蛋白表達(dá)下降，與腦心通大劑量組相比，結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:腦缺血后腦組織中Akt、CREB及Bcl-2的活性形式表達(dá)降低。大劑量腦心通可以改善神經(jīng)癥狀，減輕腦水腫，減輕腦梗死體積，保護(hù)局灶性缺血腦組織。應(yīng)用PI3-k抑制劑LY294002后，缺血區(qū)腦組織p-Akt、p-CREB蛋白表達(dá)下調(diào)，可部分逆轉(zhuǎn)腦心通的保護(hù)作用。腦心通對缺血性腦血管病的保護(hù)作用可能與上調(diào)Akt