分子超聲造影成像評(píng)估動(dòng)脈粥樣硬化小鼠升主動(dòng)脈炎性損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:血管黏附分子的高水平表達(dá)是動(dòng)脈粥樣硬化病變炎癥損傷的重要環(huán)節(jié)。血管細(xì)胞黏附分子-1(VCAM-1)作為重要的黏附分子之一，其表達(dá)上調(diào)不僅是血管內(nèi)皮損傷的早期分子標(biāo)志，而且其表達(dá)水平能夠在一定程度上反映內(nèi)皮炎性損傷的程度。本研究利用攜 VCAM-1單克隆抗體靶向微氣泡，動(dòng)態(tài)觀察這種靶向微氣泡對(duì)不同病變階段的動(dòng)脈粥樣硬化病變特異分子表型的檢測(cè)能力，探討超聲造影成像中特異性分子信號(hào)強(qiáng)度與VCAM-1表達(dá)以及炎性損傷變化之間的關(guān)系。

2、>　　方法:62只高脂飲食喂養(yǎng)的雄性載脂蛋白E（ApoE）基因敲除小鼠作為年齡依賴性動(dòng)脈粥樣硬化病變模型，另54只普通飼料喂養(yǎng)的雄性C57BL/6J小鼠作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別于8、16、24、32周齡，采用超聲造影成像觀測(cè)小鼠近端升主動(dòng)脈內(nèi)攜VCAM-1單克隆抗體靶向微氣泡的特異性顯影增強(qiáng)效果；熒光顯微鏡下離體觀察靶向微氣泡對(duì)主動(dòng)脈動(dòng)脈粥樣硬化病變的特異性粘附作用；獲取近端升主動(dòng)脈組織進(jìn)行H&E染色、Mac-2染色以及Weste

3、rn Blot分析，評(píng)估各周齡組小鼠動(dòng)脈粥樣硬化病變進(jìn)展程度、單核/巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)程度以及VCAM-1的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:高脂飲食喂養(yǎng)的ApoE基因敲除小鼠，其動(dòng)脈粥樣硬化病變呈年齡依賴性進(jìn)展，8周齡時(shí)動(dòng)脈內(nèi)膜可出現(xiàn)散在的脂肪紋，至32周齡即可見(jiàn)廣泛的動(dòng)脈粥樣斑塊形成；超聲造影成像中，ApoE基因敲除小鼠近端升主動(dòng)脈內(nèi)攜VCAM-1單克隆抗體靶向微氣泡的信號(hào)強(qiáng)度均顯著高于同齡對(duì)照組小鼠；ApoE基因敲除小鼠中，自8周齡至32周齡

4、組，近端升主動(dòng)脈內(nèi)靶向微氣泡信號(hào)強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)，依次為3.44±0.39dB、5.02±1.31dB、10.03±1.96dB、23.9±3.9dB，各組間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；ApoE基因敲除小鼠近端升主動(dòng)脈VCAM-1的表達(dá)水平以及單核/巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)的范圍亦呈年齡依賴性的增加，表明炎癥損傷程度的進(jìn)行性加重。對(duì)照組C57BL/6J小鼠中靶向微氣泡信號(hào)強(qiáng)度、升主動(dòng)脈VCAM-1的表達(dá)水平以及單核/巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)范圍在各周齡組間均無(wú)顯著性差異。