胃癌組織中P53、MMP-2、E-cadherin的表達(dá)及臨床意義的研究.pdf

1、目的：惡性腫瘤性疾病作為威脅人類健康主要疾病之一，人類對(duì)其進(jìn)行了廣泛及深入的研究。研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤最基本的生物學(xué)特征，是一具有多步驟、多因素、多因子共同參與的復(fù)雜過(guò)程?，F(xiàn)代分子生物學(xué)研究認(rèn)為，惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展至少需要2個(gè)或2個(gè)以上活化的癌基因協(xié)同作用才能使正常細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。對(duì)腫瘤研究的過(guò)程中揭示了許多癌基因、抑癌基因及腫瘤相關(guān)基因點(diǎn)位，探討它們的作用機(jī)制以期為臨床治療提過(guò)新的靶點(diǎn)成為腫瘤研究的熱點(diǎn)。本研究旨在

2、探討p53基因和基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和E--鈣黏附素(E-cadherin)的表達(dá)程度和功能活性狀態(tài)與腫瘤發(fā)生及癌細(xì)胞的浸潤(rùn)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分化關(guān)系，以及p53、MMP-2和E-cadherin表達(dá)與其臨床病理特征的關(guān)系。對(duì)它們的獨(dú)立因素研究已經(jīng)較為廣泛和深入，現(xiàn)有必要進(jìn)行多基因聯(lián)合表達(dá)的綜合評(píng)估，從而有可能獲得有關(guān)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為，包括其形成、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)方面的新發(fā)現(xiàn)。
　　 方法：收集自2000年6月至2005年6

3、月保定市第一醫(yī)院60例胃癌根治術(shù)患者標(biāo)本，所有患者術(shù)前均未經(jīng)任何抗癌治療。60例中男性38例，女性22例，平均年齡61.6歲。按Lauren組織學(xué)分型，以UICC制定的TNM分期判定腫瘤浸潤(rùn)深度、淋巴轉(zhuǎn)移及胃癌分期。所有胃癌組織標(biāo)本均由病理組織學(xué)確診。胃賁門部20例，竇部16例，胃體部13例，胃底11例。高分化癌16例，中分化癌14例，低/未分化癌30例，癌細(xì)胞浸潤(rùn)至粘膜層7例，癌細(xì)胞浸潤(rùn)至肌層13例，癌細(xì)胞浸潤(rùn)至漿膜層34例，癌細(xì)胞浸

4、潤(rùn)至漿膜外6例；有區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移48例，無(wú)區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移12例，其中6例遠(yuǎn)處廣泛轉(zhuǎn)移。全部標(biāo)本經(jīng)10％中性甲醛液固定24小時(shí)，石蠟包埋，4μm連續(xù)切片，常規(guī)HE染色，免疫組化按S-P試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。正常胃粘膜切片為陰性對(duì)照。檢測(cè)60例胃癌組織中p53、MMP-2和E-cadherin蛋白表達(dá)水平。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：p53：蛋白均以細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕色顆粒為陽(yáng)性表達(dá)。陽(yáng)性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞的25％以上為陽(yáng)性，＜25％為陰性。E-cadherin

5、:細(xì)胞膜有棕黃色顆粒沉著為正常表達(dá)，陽(yáng)性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞的25％以上為正常表達(dá)，＜25％為異常表達(dá)。MMP-2:胞膜和胞質(zhì)內(nèi)顯示棕黃色顆?；驁F(tuán)塊者視為為陽(yáng)性表達(dá)。陽(yáng)性細(xì)胞＜10％者為陰性(-)，≥10％者為陽(yáng)性(+)。
　　 結(jié)果：P53在胃癌組織中表達(dá)陽(yáng)性率為55％，在癌周正常組織中表達(dá)為陰性，患者年齡、腫瘤大小、部位、分化程度和TNM分期的P53陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與文獻(xiàn)報(bào)道相似。P53的表達(dá)與浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有關(guān)

6、，浸透漿膜層的及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織中的P53表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于未浸透漿膜層的和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。MMP-2在胃癌組織中表達(dá)多呈強(qiáng)陽(yáng)性，陽(yáng)性率為68.7％，在癌旁組織中多呈弱陽(yáng)性表達(dá)。患者年齡、腫瘤大小、部位的P53陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，在TNM分期Ⅲ、Ⅳ期的胃癌組織中表達(dá)率為77.8％，明顯高于Ⅰ、Ⅱ期的54.1％(P＜0.01)。低/未分化胃癌組織中的MMP2表達(dá)陽(yáng)性率為88.3％，明顯高于高

7、分化和中分化胃癌組織中的MMP2表達(dá)陽(yáng)性率；浸透漿膜層胃癌組織中的MMP2表達(dá)陽(yáng)性率為76.0％，明顯高于未浸透漿膜層胃癌組織中的MMP2表達(dá)陽(yáng)性率；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織中的MMP2表達(dá)陽(yáng)性率為77.1％，明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織中的MMP2表達(dá)陽(yáng)性率；E-cadherin在正常胃粘膜組織中表達(dá)陽(yáng)性率為100％，在胃癌組織中表達(dá)陽(yáng)性率為56.7％，有顯著差別(P＜0.05)。患者年齡、腫瘤大小、部位的E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)

8、率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在低/未分化的胃癌組織中E-cadherin減弱表達(dá)率明顯低于高中分化的胃癌組織；在浸透漿膜層的胃癌組織中E-cadherin減弱表達(dá)率明顯低于未浸透漿膜層的胃癌組織；在TNM分期Ⅲ、Ⅳ期的胃癌組織中表達(dá)率為36.1％，明顯低于Ⅰ、Ⅱ期的87.5％(P＜0.01)。在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織中E-cadherin減弱表達(dá)率明顯低于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性的胃癌組織。由此可分析，癌與癌周組織其表達(dá)陽(yáng)性率的差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.0

9、5);MMP-2，E-cadherin的表達(dá)不僅與Lauren組分型、TNM分期有關(guān)，P53、MMP-2，E-cadherin的表達(dá)均與浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。P53、MMP-2表達(dá)陽(yáng)性者E-cadherin陰性率高，相關(guān)系數(shù)-0.37，經(jīng)檢驗(yàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。胃癌組織中P53的表達(dá)與MMP-2表達(dá)呈正相關(guān)，P53、MMP-2與E-cadherin表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)，隨著胃癌腫瘤的進(jìn)展，胃癌組織中E-cadherin表達(dá)呈逐漸下降趨勢(shì)，而

10、P53，MMP-2表達(dá)則明顯的升高。胃癌組織中MMP-2表達(dá)在分化程度越低、分期越晚的陽(yáng)性率越高，反之，E-cadherin異常表達(dá)率越低。E-cadherin、MMP-2表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，隨著胃癌的進(jìn)展，胃癌組織中E-cadherin表達(dá)逐漸下降，MMP-2表達(dá)則明顯升高。分化程度低、分期晚的E-cadherin異常表達(dá)率越低的胃癌組織中的MMP-2陽(yáng)性率明顯高于中高分化程度、分期早的。胃癌組織中侵襲程度強(qiáng)伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性患者P53、M

11、MP-2、E-cadherin的異常表達(dá)率明顯高于陰性患者，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：p53、MMP-2和E-cadherin的表達(dá)與胃癌癌淋巴結(jié)侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)，其所導(dǎo)致的腫瘤細(xì)胞增殖及微血管的形成與侵犯轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。且三者之間有著明顯的關(guān)聯(lián)性，在胃癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中有著協(xié)同及促進(jìn)作用。p53基因突變后MMP-2表達(dá)增強(qiáng)，E-cadherin表達(dá)逐漸下降，MMP-2表達(dá)則明顯升高。因此聯(lián)合檢測(cè)p53、MMP-2