不同劑量氯磷定與阿托品治療有機磷與擬除蟲菊酯類混合農(nóng)藥中毒的實驗研究.pdf

1、目的：自1932年德國蘭格首次合成有機磷化合物并用于農(nóng)業(yè)以來，有機磷農(nóng)藥成為全世界范圍應用最廣泛的一類高效殺蟲劑，品種多達百余種。由于其毒性強，使用廣泛，故極易因保管、防護不當或誤服、自服等而引起中毒。有機磷農(nóng)藥中毒是我國農(nóng)村常見中毒之一，亦是最常見的農(nóng)藥中毒。近年來，我國農(nóng)藥中毒的總人數(shù)有所下降，但混配農(nóng)藥中毒的病例數(shù)卻在逐年增加。我國今年報告的復配農(nóng)藥中毒的病例多數(shù)為有機磷與擬除蟲菊酯類混合農(nóng)藥中毒，1991～1995年報告的有機磷

2、與擬除蟲菊酯類混合農(nóng)藥中毒的病例數(shù)是1985～1990年的四倍。同時，自80年代初擬除蟲菊酯類農(nóng)藥被廣泛應用于防治農(nóng)作物和衛(wèi)生病蟲害以來，逐漸普遍出現(xiàn)抗藥性，防治效果逐年降低。為解決多種病害并存并延緩抗藥性的需要，菊酯類農(nóng)藥越來越多地使用混配形式，特別是與有機磷混合制劑在我國殺蟲劑的登記品種中所占比例相當大。擬除蟲菊酯類農(nóng)藥對人類低毒，長時間皮膚吸收，口服可引起中毒，通過影響神經(jīng)軸突的傳導而導致肌肉痙攣等。目前，阿托品和肟類膽堿酯酶復能

3、劑是治療有機磷農(nóng)藥中毒的有效藥物，而擬除蟲菊酯類農(nóng)藥中毒尚無特效藥物治療。有機磷與擬除蟲菊酯類混配農(nóng)藥中毒治療應用抗膽堿能藥（阿托品）和膽堿酯酶復能劑（氯磷定）搶救有機磷農(nóng)藥中毒，再根據(jù)病情給予對癥、支持療法，維持水、電解質及酸堿平衡，控制抽搐，預防肺水腫、腦水腫及呼吸、循環(huán)衰竭。總之，混配農(nóng)藥中毒是目前面臨的新課題，摸清復合農(nóng)藥中毒發(fā)病的危險因素，探尋混配農(nóng)藥的生物標志物，進一步解決混配農(nóng)藥中毒的診斷與合理治療方案。本研究通過制備有機

4、磷混合農(nóng)藥中毒大鼠模型，觀察實驗動物的中毒表現(xiàn)、血清膽堿酯酶及CRP變化趨勢，以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后電鏡表現(xiàn)，探討不同劑量氯磷定及阿托品對有機磷與擬除蟲菊酯類混合農(nóng)藥中毒大鼠的治療效果，為臨床提供理論依據(jù)。
　　 方法：選用健康成年SD大鼠70只，隨機分為7組：空白對照組(A組)10只，染毒未治療組(B組)10只，大劑量氯磷定+適量阿托品治療組(C組）10只，小劑量氯磷定+適量阿托品組（D組）10只，大劑量阿托品+適量氯磷定組（

5、E組）10只，中等量阿托品+適量氯磷定組（F組）10只，小劑量阿托品+適量氯磷定組（G組）10只。B、C、D、E、F、G組均一次性給予20％氯氰·辛硫磷乳油20mg/Kg(0.1ml/100g)經(jīng)口灌胃染毒，A組給予等量的生理鹽水灌胃。染毒后，各治療組給予不同劑量的氯磷定和阿托品肌肉注射：第1天：C組氯磷定首劑6mg，3mgq1h×3，3mgq2h×3，3mgq3h;阿托品首劑1.5mg，1mgq2h×2，0.5mgq3h×2，0.5m

6、gq4h;D組氯磷定首劑3mg，1.5mgq2h×3;阿托品用法同C；E組阿托品首劑3mg，2mgq2h×2，1.5mgq3h×2，1mgq4h;氯磷定首劑3mg，1.5mgq2h×3，1.5mgq3h;F組阿托品用法同C;氯磷定用法同E；G組阿托品首劑0.5mg，0.5mgq2h×2，0.25mgq3h×2，0.25mgq4h;氯磷定用法同E。第2天：C組氯磷定3mg，q4h;阿托品0.5mgq4h;D組氯磷定1.5mgq6h;阿托品

7、用法同C;E組阿托品1mg，q4h;氯磷定1.5mg，q4h×2，1.5mgq6h;F組阿托品用法同C;氯磷定用法同E；G組阿托品0.25mgq4h;氯磷定用法同E。第3天：C組氯磷定3mg，q6h;阿托品0.25mgq6h;D組氯磷定0.5mgq6h;阿托品用法同C;E組阿托品0.5mg，q6h;氯磷定1.5mg，q6h;F組阿托品用法同C;氯磷定用法同E;G組阿托品0.1mgq6h;氯磷定用法同E。第4～5天：C組氯磷定3mg，q1

8、2h;阿托品0.25mgq12h;D組氯磷定0.5mg.q12h;阿托品用法同C;E組阿托品0.5mg，q12h;氯磷定1.5mg，q12h;F組阿托品用法同C;氯磷定用法同E;G組阿托品0.1mgq12h;氯磷定用法同E。第6～7天：C組氯磷定3mg，qd;阿托品0.25mgqd;D組氯磷定0.5mgqd;阿托品用法同C;E組阿托品0.5mg，qd;氯磷定1.5mg，qd;F組阿托品用法同C;氯磷定用法同E;G組阿托品0.1mgqd;

9、氯磷定用法同E。各組大鼠在染毒后12h，1d，4d，7d剪尾采血測定血清膽堿酯酶值；各組在染毒后1d，3d，7d剪尾采血測定血清CRP值；各組在染毒后1w處死，均采用4％水合氯醛(1ml/100g)麻醉，開顱，留取大腦皮層和海馬組織，4％戊二醛固定，電鏡下觀察細胞形態(tài)結構以了解中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害情況。
　　 結果：
　　 1.大鼠中毒表現(xiàn)：經(jīng)口灌胃染毒5mins～10mins后，B組未治療大鼠在染毒后出現(xiàn)流淚、流涎、肌顫及

10、輕微肌力下降等癥狀，且在1～3d最明顯；而應用不同劑量氯磷定及阿托品治療組大鼠中毒癥狀較B組輕，C組大鼠經(jīng)治療后無明顯流淚、流涎、肌顫、肌無力、驚厥及四肢震顫等癥狀；E、F、G各組大鼠經(jīng)治療后均有比較輕微的流淚、流涎、肌顫及后肢肌力下降等癥狀；D組大鼠經(jīng)治療后表現(xiàn)輕微的流淚、流涎、肌顫及后肢肌力下降等癥狀?？傮w上，D組中毒表現(xiàn)較其他治療組明顯，而E、F、G三組間無明顯差異，次之，C組最輕微(D＞E=F=G＞C)。
　　 2.血清

11、膽堿酯酶測定：染毒后12h:各組比較H=65.222，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；各組間兩兩比較中，E組與G組相比較，P=0.448＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，認為兩組之間沒有差異；其余各組兩兩比較P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；染毒后12h各實驗組大鼠血清膽堿酯酶總體變化：A＞C＞F＞E=G＞D＞B。染毒后1d:各組比較P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；各組間兩兩比較中P＜0.0

12、5，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；染毒后1d各實驗組大鼠血清膽堿酯酶總體變化：A＞C＞F＞E＞G＞D＞B。染毒后4d：各組比較H=65.369，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；各組間兩兩比較中，E組與G組相比較，P=0.130＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，認為兩組之間沒有差異；其余各組兩兩比較P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；染毒后4d各實驗組大鼠血清膽堿酯酶總體變化：A＞C＞F＞E=G＞D＞B。染

13、毒后7d:各組比較H=62.509，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；各組間兩兩比較中，A組與C組相比較，P=0.292＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，認為兩組之間沒有差異；E組與G組相比較，P=0.878＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，認為兩組之間沒有差異；E組、F組與G組相比較，P=0.086＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，認為三組之間沒有差異；其余各組兩兩比較P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；染毒后7d各實驗組

14、大鼠血清膽堿酯酶總體變化：A=C＞E=F=G＞D＞B。
　　 3.血清CRP測定：染毒后1d:各組比較H=63.295，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；各組間兩兩比較中，E組與F組相比較，P=0.327＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，認為兩組之間沒有差異；E組與G組相比較，P=0.175＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，認為兩組之間沒有差異；E組、F組與G組相比較，P=0.055＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，認為三組之間治

15、療沒有差異；其余各組兩兩比較P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；染毒后1d各實驗組大鼠血清CRP總體變化：B＞D＞E=F=G＞C＞A。染毒后3d：各組比較H=63.401，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；各組間兩兩比較中，E組與F組相比較，P=0.323＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，認為兩組之間沒有差異；E組與G組相比較，P=0.171＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，認為兩組之間沒有差異；E組、F組與G組相比較

16、，P=0.053＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，認為三組之間治療沒有差異；其余各組兩兩比較P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；染毒后3d各實驗組大鼠血清CRP總體變化：B＞D＞E=F=G＞C＞A。染毒后7d:各組比較P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；各組間兩兩比較中，A組與C組相比較，P=0.174＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，認為兩組之間沒有差異；E組與G組相比較，P=0.761＞0.05，沒有統(tǒng)計學意義，認為

17、兩組之間治療沒有差異；其余各組兩兩比較P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，認為各組之間存在差異；染毒后7d各實驗組大鼠血清CRP總體變化：B＞D＞E=G＞F＞C=A。
　　 4.空白對照組，染毒治療與未治療組SD大鼠大腦皮層及海馬電鏡檢測結果：空白對照組（A組）電鏡下觀察大鼠大腦皮層及海馬神經(jīng)細胞，神經(jīng)膠質細胞，髓鞘板層，軸索內(nèi)神經(jīng)微管，血管基底膜，血管周圍間隙結構正常。未治療組（B組）電鏡下觀察染毒后未予治療的大鼠大腦皮層及海馬神經(jīng)細

18、胞和神經(jīng)膠質細胞嚴重水腫，胞膜不完整，胞質中有嚴重水腫空泡，局部核周隙擴張，局部雙層膜溶解消失，部分細胞膜融合消失。髓鞘板層之間出現(xiàn)分層現(xiàn)象，軸索內(nèi)神經(jīng)微管嚴重紊亂，血管基底膜出現(xiàn)多個空泡，血管周圍間隙增寬，其內(nèi)浮少量線粒體及腫脹的內(nèi)質網(wǎng)。各治療組（C、D、E、F、G組）電鏡下觀察染毒后經(jīng)給予不同劑量氯磷定及阿托品治療的大鼠大腦皮層及海馬出現(xiàn)程度不等的中毒表現(xiàn)，與B組相比較，C組給予大劑量氯磷定后神經(jīng)細胞及神經(jīng)膠質細胞輕度水腫，胞膜基本

19、完整，髓鞘板層之間未見明顯分層現(xiàn)象，軸索內(nèi)神經(jīng)微管排列較整齊，血管基底膜基本完整，血管周圍間隙基本正常；E、F、G組均給予適量的氯磷定后神經(jīng)細胞及神經(jīng)膠質細胞水腫較明顯，部分胞膜完整，髓鞘板層之間未見分層現(xiàn)象，軸索內(nèi)神經(jīng)微管排列較紊亂，血管基底膜可見少量空泡，血管周圍間隙基本正常；D組給予小劑量氯磷定后神經(jīng)細胞及神經(jīng)膠質細胞明顯水腫，胞膜不完整，髓鞘板層之間可見分層現(xiàn)象，軸索內(nèi)神經(jīng)微管排列較紊亂，血管基底膜可見空泡，血管周圍間隙增寬?？?/p>

20、體上空白對照組，未治療組與各治療組經(jīng)給予不同劑量氯磷定及阿托品治療后大鼠大腦皮層及海馬損傷程度表現(xiàn)為B＞D＞E=F=G＞C＞A。
　　 結論：
　　 1.有機磷與擬除蟲菊酯類混合農(nóng)藥中毒表現(xiàn)以有機磷農(nóng)藥中毒表現(xiàn)為主，與擬除蟲菊酯類農(nóng)藥中毒表現(xiàn)部分重疊，擬除蟲菊酯類中毒的中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀不明顯。
　　 2.重用復能劑（氯磷定），輔以適量阿托品的治療原則，適用于有機磷與擬除蟲菊酯類混合農(nóng)藥中毒，主要表現(xiàn)在中毒后大鼠血