DC聯(lián)合CIK治療的惡性實(shí)體瘤患者外周血Treg與Ts監(jiān)測(cè)及意義.pdf

1、目的：
　　觀察自體DC-CIK治療惡性實(shí)體瘤的近期臨床療效與免疫功能，治療前后外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與抑制性T細(xì)胞的變化，為判斷DC-CIK的療效提供新的免疫監(jiān)測(cè)指標(biāo)。
　　方法：
　?、俨杉颊咄庵苎獑魏思?xì)胞，分離之后在體外培養(yǎng)獲得成熟的DC、CIK細(xì)胞，培養(yǎng)過(guò)程中以臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)細(xì)胞的數(shù)量及活力，然后細(xì)胞成熟后符合標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞由靜脈回輸?shù)綈盒詫?shí)體瘤患者的體內(nèi)。
　?、?3例惡性腫瘤患者均接受了1-2個(gè)周期細(xì)胞免疫

2、治療，即回輸4-8×106DC和5-10×109CIK，細(xì)胞免疫治療聯(lián)合化療的患者，自體細(xì)胞的回輸均在化療后3天。
　?、弁ㄟ^(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)培養(yǎng)成熟的DC、CIK的表面標(biāo)記，治療前后患者的淋巴細(xì)胞亞群、Treg、Ts、CTL水平。同時(shí)以門診體檢的年齡相似的12例健康人（45-65歲）作為健康對(duì)照組。
　?、苡^察患者治療前后影像學(xué)變化、腫瘤標(biāo)記物、疼痛程度及不良反應(yīng)等。
　　結(jié)果：
　　(1)培養(yǎng)后DC表面CD83

3、（83.42±13.53），CD86（93.97±8.45），CD40(78.18±17.28)，HLADR(92.00±.09)。培養(yǎng)后CIK表面CD3(96.58±2.54)，CD3+CD4+(30.21±11.51),CD3+CD8+(58.08±9.48),CD3+CD56+(15.37±1.23),CD3比率較培養(yǎng)前明顯提高（72.98±10.71VS96.58±2.54，P＜0.05）。
　　(2)治療后外周血CD3+

4、比率明顯高于治療前(P＜0.05);CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD56+比率均高于治療前，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　(3)治療前外周血中的Treg與Ts細(xì)胞比率均高于健康對(duì)照組，CTL細(xì)胞的比率低于健康對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　(4)治療后外周血Treg細(xì)胞比率明顯低于治療前，CTL細(xì)胞的比率明顯高于治療前(P＜0.05);Ts細(xì)胞比率低于治療前，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　(5)治

5、療后外周血Ts細(xì)胞比率高于健康對(duì)照組，CTL比率低于健康對(duì)照組，并且差異已無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，Treg細(xì)胞比率高于健康對(duì)照組(P＜0.05)，但差值幅度縮小。
　　(6)DC-CIK治療1個(gè)月后復(fù)查達(dá)CR3例，PR8例，SD26例，PD6例。有效率(CR+PR)達(dá)23.63％，臨床獲益率(CR+PR+SD)達(dá)88.37％。
　　(7)腫瘤患者分為腫瘤控制組(CR+PR+SD)組和腫瘤進(jìn)展(PD)組，其中(CR+PR

6、+SD)組中Treg細(xì)胞比率升有6例較治療前升高，31例降低;SD組中有4例升高，2例降低，兩組數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)Pearson卡方檢驗(yàn)P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(CR+PR+SD)組中Ts細(xì)胞比率有13例較治療前升高，24例降低;SD組中有3例升高，3例降低，兩組數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)Pearson卡方檢驗(yàn)P＞0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　(8)監(jiān)測(cè)血清腫瘤標(biāo)志物，其中CA199、CEA、CA125、CA724及AFP治療后有下降趨勢(shì)，但差異

7、無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　(9)患者在細(xì)胞回輸過(guò)程中及回輸后，均未出現(xiàn)Ⅲ°以上不良反應(yīng)。3例患者回輸過(guò)程中出現(xiàn)發(fā)熱癥狀，體溫最高達(dá)39℃，給予退熱治療后緩解;無(wú)其他不良反應(yīng)，如過(guò)敏、休克、骨髓抑制、肝腎功能損害等。
　　(10)16例消化系統(tǒng)腫瘤治療前外周血Treg、Ts比率明顯高于健康對(duì)照組，CTL明顯低于健康對(duì)照組(P＜0.05)，治療后外周血Treg、Ts比率高于健康對(duì)照組，CTL低于健康對(duì)照組，但差異已無(wú)統(tǒng)

8、計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);治療后外周血Treg比率明顯低于治療前，CTL比率明顯高于治療前(P＜0.05);療后外周血Ts比率較低于治療前(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　?、倥囵B(yǎng)后DC細(xì)胞的CD83，HLADR表達(dá)率均＞75％，CD86，CD40均大于50％，CIK細(xì)胞CD3+CD56+比率均值達(dá)15.37％，臺(tái)盼藍(lán)染色活力均＞90％。
　?、谀[瘤患者體內(nèi)Treg和Ts細(xì)胞水平高于健康人水平。
　?、跠C聯(lián)合C