LIF在胎盤及血漿中的表達與子癇前期的相關(guān)性分析.pdf

1、背景：
　　妊娠期高血壓疾病(hypertensive diseases complicating pregnancy,HDCP)是一種病因至今尚未明確的嚴重危害母嬰健康的妊娠特有的疾病。據(jù)報道，全世界每3分鐘就有一位孕婦因子癇前期和子癇而致死，其是導(dǎo)致孕產(chǎn)婦圍產(chǎn)期患病率和死亡率升高的主要原因之一。目前普遍認為HDCP的發(fā)生是多種因素綜合作用的結(jié)果，但胎盤因素是其主要的病因之一。滋養(yǎng)細胞是構(gòu)成胎盤的主要結(jié)構(gòu)，其浸潤能力下降導(dǎo)致的胎

2、盤淺著床可能是子癇前期和子癇發(fā)生的重要病理基礎(chǔ)。
　　白血病抑制因子（1eukemia inhibitory factor,LIF）是擁有多種生物學(xué)效應(yīng)的屬于IL-6家族的一種細胞因子，它可通過多種途徑作用于許多不同的細胞類型，其在妊娠的整個過程中幾乎都起著作用。
　　妊娠的生理過程受到許多來自母胎界面的細胞因子的調(diào)節(jié)，研究表明LIF在胚胎植入過程中起到至關(guān)重要的作用。而人類胚胎植入的過程非常復(fù)雜，受到多種因素的影響，其實質(zhì)

3、是滋養(yǎng)細胞對子宮內(nèi)膜基質(zhì)的侵入從而完成血管重鑄。研究證實，LIF可通過多種途徑影響滋養(yǎng)細胞的浸潤能力，從而有利于妊娠的維持，其表達失調(diào)時可引起病理妊娠。當LIF表達下降時，可導(dǎo)致滋養(yǎng)細胞浸潤能力下降、胎盤淺著床，從而導(dǎo)致了HDCP的發(fā)生;而當LIF表達升高時，可導(dǎo)致滋養(yǎng)細胞腫瘤的發(fā)生。目前國內(nèi)外關(guān)于LIF在HDCP中的研究甚少，因此，其在HDCP的發(fā)病機制中所起的作用也顯得尤為重要。
　　目的：
　　通過采用免疫組化SP法及

4、酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)對子癇前期患者和正常妊娠孕婦胎盤組織及血漿中LIF蛋白的表達情況進行檢測，進而分析其在子癇前期患者胎盤及血漿中的表達情況及與新生兒體重、胎盤重量之間的相互關(guān)系，以及胎盤與血漿中LIF蛋白表達水平之間的相互關(guān)系。初步探討子癇前期發(fā)病機制中LIF蛋白所起的作用及對圍產(chǎn)兒結(jié)局的影響，從而為HDCP的發(fā)病機制提供一定的理論基礎(chǔ)，并為妊高癥的管理方面提供新的思路和方法。
　　資料及方法：
　　1、對象<

5、br>　　取鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院產(chǎn)科2012年7月至2013年5月期間住院分娩的子癇前期(preeclampsia，PE)患者60例（PE的診斷標準參照第7版樂杰主編的人民衛(wèi)生出版社出版的《婦產(chǎn)科學(xué)》）。按疾病嚴重程度將子癇前期患者分為輕度子癇前期(Mild preeclampsia,MPE)組和重度子癇前期（Severe preeclampsia,SPE）組，各30例，同時隨機抽取同期住院分娩的健康孕婦30例。所有入選患者均排除妊娠期

6、糖尿病、妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥、慢性內(nèi)外科疾病等妊娠特發(fā)合并癥，高血壓、糖尿病、心臟病等原發(fā)性慢性病史，胎膜早破、羊水過多或過少、胎盤早剝等妊娠合并癥。所有研究對象均為單胎妊娠、自然受孕，產(chǎn)前無明顯宮縮、妊娠結(jié)局均為剖宮產(chǎn)（手術(shù)指征為:社會因素、臀位、橫位、子癇前期等）。其中，子癇前期患者均為晚發(fā)型子癇前期，即發(fā)病于孕34周后。
　　2、方法
　　(1)當胎盤娩出后，立即取避開大血管和鈣化點的大小約1cm×1cm×1cm的臍帶

7、附著處，胎盤母體面的胎盤組織，隨后用生理鹽水將其沖洗干凈，然后以10％福爾馬林液進行固定，石蠟包埋后切取4μm切片。隨后采用HE及免疫組織化學(xué)SP法對胎盤組織中LIF蛋白的表達情況進行檢測。本實驗利用圖像采集分析系統(tǒng)對LIF蛋白的表達水平進行測定，且以平均光密度值對結(jié)果進行半定量表示。新生兒體重的測定，待新生兒臍帶處理完畢后進行。胎盤重量的測定，待減去胎膜與臍帶(臍帶殘留需＜2cm)且胎盤表面的凝血塊及附著血液擦拭干凈后進行，單位均精確

8、到克(g)。
　　(2)所有研究對象均于入院當日空腹抽取肘靜脈血4ml，置于3.8％枸櫞酸抗凝管中，于30min內(nèi)以3000r/min的速度離心15min，分離血漿后，分裝保存于-80℃冰箱中待測。
　　(3)實驗結(jié)果的分析采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，一般計量資料用x±s表示，符合正態(tài)分布、總體方差齊的多組定量資料間的比較，采用ANOVA分析;符合正態(tài)分布的兩組定量資料間的相關(guān)性分析，采用Pearman相關(guān)分析，檢驗水準為

9、α=0.05，當P＜0.05時有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、三組研究對象在年齡、孕周方面的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　2、LIF蛋白在三組胎盤組織中的平均光密度值分別為:對照組:158.13±26.49，MPE組:129.28±29.54，SPE組:97.86±24.39。三組間兩兩比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3、LIF蛋白在三組血漿中的含量分別為:對照組:643.69±24

10、3.13,MPE組:409.13±157.50，SPE組:373.34±156.73。其中，對照組分別與MPE組、SPE組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。但SPE組與MPE組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　4、三組新生兒體重分別為:對照組:3342.67±381.08g，MPE組:3082.30±328.59g，SPE組:2763.00±437.80g。三組間兩兩比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。<

11、br>　　5、三組胎盤重量分別為:對照組:553.90±70.52g，MPE組:514.97±56.68g，SPE組:455.93±73.39g。其中，SPE組分別與對照組、MPE組相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。但MPE組與對照組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　6、LIF蛋白的表達水平隨著子癇前期病情的加重而呈逐漸下降的趨勢，其中SPE組患者胎盤及血漿之間的表達水平存在正相關(guān)(r=0.380，P＜0.05

12、)，而對照組及MPE組之間不存在明顯的相關(guān)性(P＞0.05)。三組胎盤組織中LIF蛋白的表達水平與胎盤重量、新生兒體重均呈顯著正相關(guān)（正常妊娠組分別為:r=0.435，P＜0.05;r=0.557，P＜0.05。MPE組分別為:r=0.475，P＜0.05;r=0.573，P＜0.05。SPE組分別為:r=0.389，P＜0.05;r=0.454，P＜0.05）。三組血漿的LIF蛋白含量與胎盤重量、新生兒體重均呈顯著正相關(guān)（正常妊娠組分

13、別為:r=0.409,P＜0.05;r=0.532，P＜0.05。MPE組分別為:r=0.465，P＜0.05;r=0.503，P＜0.05。SPE組分別為:r=0.698，P＜0.05;r=0.730，P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、LIF蛋白在胎盤及血漿中的表達水平隨著妊娠期高血壓疾病嚴重程度的增加呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢，提示其可能與子癇前期的發(fā)病相關(guān)。
　　2、LIF蛋白在重度子癇前期患者血漿及胎盤中的表達呈顯