分子印跡—流動注射化學發(fā)光法測定利福平和鹽酸強力霉素.pdf

1、分子印跡技術(shù)(molecular imprinting technique，MIT)是制備對模板分子具有專一識別能力的分子印跡聚合物(molecularly imprinted polymers，MIP)的技術(shù)。分子印跡聚合物中存在在空間結(jié)構(gòu)上與模板分子大小和形狀相匹配的立體空穴，且同時含有與模板分子相匹配的結(jié)合位點。MIP具有選擇性高、機械強度高、穩(wěn)定性好、再生性能好等優(yōu)點，對模板分子顯示出較強的分離和富集能力，在環(huán)境領域、藥物分析、

2、食品分析、生化分離、生物傳感器技術(shù)等領域有了快速發(fā)展，展現(xiàn)出良好的應用前景。 化學發(fā)光(chemiluminescence，CL)分析法具有靈敏度高、儀器設備簡單、操作方便、分析速度快等優(yōu)點，因而被廣泛地應用于環(huán)境監(jiān)測、臨床檢驗、藥物分析和工業(yè)分析等領域，但是其選擇性差，使該方法在復雜樣品中的分析與應用受到了限制。本論文將分子印跡技術(shù)應用于流動注射化學發(fā)光分析中，利用分子印跡聚合物對模板分子的專一識別性能和捕獲能力，使模板分子與

3、樣品中的共存物分離，然后進行化學發(fā)光檢測，彌補了化學發(fā)光法選擇性不理想的缺點。全文共分六章。 第一章：簡要介紹了分子印跡技術(shù)的原理及分子印跡聚合物的制備方法，綜述了分子印跡聚合物在模擬生物傳感器、模擬酶催化、作為輔料用于控釋給藥系統(tǒng)等中的應用，討論了分子印跡技術(shù)應用中現(xiàn)存的問題，并對后續(xù)的研究進行了展望。 第二章：以利福平(rifampicin，RFP)為模板分子、α-甲基丙烯酸(methacrylic acid，MAA

4、)為功能單體、乙二醇二甲基丙烯酸酯(ethylene dimethacrylate，EGDMA)為交聯(lián)劑，采用本體聚合法制備對利福平有高選擇性的利福平分子印跡聚合物。通過紫外-可見光譜探討了聚合前利福平與功能單體的結(jié)合方式和結(jié)合位點，推測了MIP合成過程和識別機理。在水溶液中，采用靜態(tài)結(jié)合方法和Scatchard模型評價了利福平分子印跡聚合物的結(jié)合特性，并考察了該MIP對利福平的選擇性吸附能力。 第三章：以聚乙烯醇1735為分散

5、劑、利福平為模板分子、甲基丙烯酸為功能單體、乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑，用水溶液微懸浮聚合法制備了利福平分子印跡聚合物微球。在水溶液中，利用靜態(tài)平衡結(jié)合法和Scatchard模型分析法研究了印跡聚合物的結(jié)合能力和選擇性。結(jié)合底物的實驗結(jié)果表明，MIP對利福平呈現(xiàn)出了較高的吸附性能和選擇識別特性，能較簡便的用于利福平的分離和富集。 第四章：以利福平印跡聚合物為分子識別物質(zhì)，利用利福平-魯米諾-鐵氰化鉀化學發(fā)光體系，結(jié)合流動注射化

6、學發(fā)光分析技術(shù)，建立了測定利福平高選擇性的分子印跡-流動注射化學發(fā)光分析方法。方法的線性范圍為1×10-8～6×10-6g/mL，方法的檢出限為9.1×10-9g/mL，對4.0×10-8g/mL的利福平溶液進行分析，9次平行測定的相對標準偏差為3.1％。利用此法測定尿樣、利福平膠囊以及利福平滴眼液中利福平的含量，結(jié)果令人滿意。 第五章：以鹽酸強力霉素(doxycycline hydrochloride，DC)為模板分子、MAA

7、為功能單體、EGDMA為交聯(lián)劑、偶氮二異丁腈(2,2'-Azobisisobutyronitrile,AIBN)為引發(fā)劑制備了鹽酸強力霉素的分子印跡聚合物，討論了合成條件對印跡效果的影響。采用傅里葉變換紅外光譜對印跡聚合物進行了表征。在水溶液中，利用靜態(tài)平衡結(jié)合法和Scatchard模型分析法研究了印跡聚合物的結(jié)合能力和選擇性。對不同底物的結(jié)合實驗結(jié)果表明，印跡聚合物對鹽酸強力霉素具有高的選擇性吸附能力。 第六章：在堿性條件下，

8、鹽酸強力霉素對魯米諾-鐵氰化鉀體系化學發(fā)光反應具有明顯的增敏作用，以鹽酸強力霉素分子印跡聚合物為分子識別物質(zhì)，利用鹽酸強力霉素-魯米諾-鐵氰化鉀化學發(fā)光體系，結(jié)合流動注射化學發(fā)光分析技術(shù)，建立了測定鹽酸強力霉素高選擇性的分子印跡-流動注射化學發(fā)光分析方法。方法的線性范圍為9.0×10-7～6.0×10-5g/mL，檢出限為3.2×10-8g/mL。對6.0×10-6g/mL的鹽酸強力霉素水溶液進行分析，9次平行測定的相對標準偏差為3.5