TL1A及其受體在潰瘍性結(jié)腸炎患者腸黏膜組織中的表達(dá).pdf

1、潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)是一種發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚的直腸和結(jié)腸的慢性易復(fù)發(fā)性非特異性炎癥性疾病，屬于炎癥性腸?。╥nflammatory bowel disease，IBD）的一種。大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為UC是在基因易患的基礎(chǔ)上，結(jié)合多種因素如周圍環(huán)境、遺傳、結(jié)腸粘膜炎癥-免疫系統(tǒng)等共同作用所導(dǎo)致，其中更多學(xué)者認(rèn)為免疫因素是本病根本的發(fā)病機(jī)制。
　　 腫瘤壞死因子配體相關(guān)分子1A(TNF Ligandr

2、elated molecule-1A，TL1A)是近年發(fā)現(xiàn)的腫瘤壞死因子超家族(Tumor necrosis factor super family，TNFSF)中的一位新成員，是TNFSF15/VEGI的蛋白產(chǎn)物。在IBD患者群中發(fā)現(xiàn)腸道黏膜層CD4+T細(xì)胞表達(dá)活躍，同時(shí)TL1A表達(dá)較正常狀態(tài)下明顯情況升高。當(dāng)TL1A與其受體死亡受體3(death receptor，DR3)結(jié)合后激發(fā)NF-κB信號(hào)通路同時(shí)發(fā)出細(xì)胞凋亡信號(hào)，TL1A另

3、一受體誘騙受體3(Decoy receptor 3，DcR3)與DR3競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合TL1A進(jìn)而阻斷細(xì)胞凋亡，但并未抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展。雖DcR3其本身既能控制某些自身免疫性疾病的炎癥反應(yīng)，在IBD類疾病中目前認(rèn)為其促炎作用較為明顯。
　　 MMPs是降解細(xì)胞外間質(zhì)(extracellular matrixc，ECM)的一類蛋白水解酶，參與組織損傷、修復(fù)過(guò)程。MMP-2屬于MMPs中明膠酶類物質(zhì)，主要參與基底膜Ⅳ型膠原代謝過(guò)程。當(dāng)

4、TL1A與DcR3所介導(dǎo)的腸道炎癥反應(yīng)程度逐漸加重時(shí)，MMP-2表達(dá)上升促使基底膜被破壞、膠原沉積，UC相關(guān)性腸纖維化改變啟動(dòng)。另一方面，TL1A與DcR3相互作用又促進(jìn)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)增生和遷移，激活內(nèi)皮細(xì)胞上調(diào)MMP2mRNA的表達(dá)及活性，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞形成新生血管，有助于腫瘤細(xì)胞逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視，進(jìn)而為UC相關(guān)性腸纖維化甚至UC相關(guān)性癌變形成

5、了鋪墊。
　　 目的:探討TL1A及其受體在潰瘍性結(jié)腸炎患者腸道組織中的表達(dá)及變化，以期為臨床UC的生物治療提供一個(gè)新的靶點(diǎn)。
　　 方法:①收集到河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院就診的UC患者腸黏膜活檢組織，入選病例符合“炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見(jiàn)（2012年·廣州）”制訂的潰瘍性結(jié)腸炎診斷標(biāo)準(zhǔn)。剔除病例標(biāo)準(zhǔn):未定型結(jié)腸炎者;腸道或其他系統(tǒng)結(jié)核疾病患者;合并腸道腫瘤者;合并全身或其他部位腫瘤患者;合并中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病者;妊娠期

6、或哺乳期婦女;嚴(yán)重認(rèn)知障礙、精神病和全身或單一系統(tǒng)疾病終末期患者。對(duì)照組腸黏膜活檢標(biāo)本取自血液常規(guī)檢查（血常規(guī)、生化、血沉、C-反應(yīng)蛋白）在正常范圍并經(jīng)結(jié)腸鏡檢查未見(jiàn)結(jié)腸病變或鏡下及病理回報(bào)為單發(fā)性良性息肉未合并其他病癥患者;②收集患者相關(guān)資料:病程、大便次數(shù)及性狀、既往史、結(jié)腸鏡檢查（病變范圍、內(nèi)鏡下表現(xiàn)）及相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查（血常規(guī)、便常規(guī)、血沉、C-反應(yīng)蛋白）等個(gè)人情況;④根據(jù)H&E病理染色將其分為對(duì)照組、炎癥組、UC相關(guān)性腸纖維化（

7、腸腔狹窄）組（以下簡(jiǎn)稱狹窄組）及UC相關(guān)性腸黏膜異型增生組（以下簡(jiǎn)稱異型增生組）;再根據(jù)組織學(xué)炎癥程度進(jìn)一步細(xì)分為:對(duì)照組、輕度炎癥組、中度炎癥組、重度炎癥組、狹窄組、異型增生組;根據(jù)Mayo評(píng)分分為:對(duì)照組、輕度活動(dòng)組、中度活動(dòng)組、重度活動(dòng)組;根據(jù)蒙特利爾分型將UC疾病累及范圍分為:對(duì)照組、E1型組、E2組（左半結(jié)腸）、E3組（廣泛結(jié)腸）;根據(jù)發(fā)病類型分為:對(duì)照組、初發(fā)組、慢性復(fù)發(fā)組;⑤應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色、Westernblot技術(shù)

8、和real-timeQ-PCR技術(shù)分別檢測(cè)結(jié)腸組織中TL1A、DcR3、NF-κBp65和MMP-2蛋白及mRNA的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:TL1A、DcR3、NF-κBp65、MMP-2相互呈正相關(guān)(P＜0.01)，且均與UC病變進(jìn)展、病變累及范圍、病變類型呈正相關(guān)。①TL1A含量隨UC病程發(fā)展其表達(dá)不同（P＜0.01），在炎癥反應(yīng)階段TL1A隨炎癥反應(yīng)加重其表達(dá)增多。在UC相關(guān)性腸纖維化階段，隨TL1A含量總體較炎癥組含量增

9、加，卻無(wú)顯著差異（P＞0.05），而狹窄組內(nèi)TL1A含量較中度炎癥組升高、較重度炎癥組降低均有顯著差異（P＜0.01）。在UC相關(guān)性異型增生階段，TL1A含量較炎癥組及狹窄組增多，但其表達(dá)較重度炎癥組降低，有顯著性差異(P＜0.01)。TL1A含量隨Mayo評(píng)分炎癥活動(dòng)度加重而表達(dá)增加（P＜0.01）。TL1A含量隨UC病變范圍擴(kuò)大而增加(P＜0.01)。TL1A在不同發(fā)病類型中含量不同，TL1A在慢性復(fù)發(fā)型患者體內(nèi)含量較初發(fā)型患者體內(nèi)

10、增多（P＜0.01）。②DcR3含量隨UC病程發(fā)展其表達(dá)含量不同（P＜0.01），DcR3表達(dá)含量逐漸增加。在炎癥反應(yīng)階段，DcR3含量隨炎癥反應(yīng)加重而增多。在UC相關(guān)性腸纖維化階段，雖DcR3含量總體較炎癥組含量增加，卻無(wú)顯著差異（P＞0.05），而腸狹窄組DcR3含量較中度炎癥組升高(P＜0.01)，較重度炎癥組降低(P＞0.05)。在UC相關(guān)性異型增生階段，DcR3含量較炎癥組及狹窄組均明顯增多（P＜0.01），但其表達(dá)較重度炎癥

11、組降低（P＜0.05）。DcR3含量隨Mayo評(píng)分炎癥活動(dòng)度加重而表達(dá)增加（P＜0.01）。DcR3含量隨UC病變范圍擴(kuò)大而增加(P＜0.01)。DcR3在不同發(fā)病類型中含量不同(P＜0.01)，DcR3在慢性復(fù)發(fā)型患者體內(nèi)含量較初發(fā)型患者體內(nèi)增多(P＜0.01)。③NF-κBp65含量隨UC病程發(fā)展其表達(dá)含量逐漸增加(P＜0.01)。在炎癥反應(yīng)階段，NF-κBp65含量隨炎癥反應(yīng)加重而增多。在UC相關(guān)性腸纖維化階段，隨NF-κBp65

12、含量總體較炎癥組含量增加，卻無(wú)顯著差異（P＞0.05），對(duì)比不同組織病理等級(jí)病變發(fā)現(xiàn)狹窄組NF-κBp65含量較中度炎癥組升高(P＜0.01)，較重度炎癥組降低(P＞0.05)。在UC相關(guān)性異型增生階段，NF-κBp65含量較重度炎癥組降低(P＜0.05)。NF-κBp65含量隨Mayo評(píng)分炎癥活動(dòng)度等級(jí)增加而表達(dá)增高(P＜0.01)。NF-κBp65含量隨UC病變范圍擴(kuò)大而增加（P＜0.01）。NF-κBp65在不同發(fā)病類型中含量不同

13、，NF-κBp65在慢性復(fù)發(fā)型患者體內(nèi)含量較初發(fā)型患者體內(nèi)增多(P＜0.01)。④MMP-2含量隨UC病程發(fā)展其表達(dá)含量不同（P＜0.01），MMP-2表達(dá)含量逐漸增加。在炎癥反應(yīng)階段，MMP-2含量隨炎癥反應(yīng)加重而增多。在UC相關(guān)性腸纖維化階段，MMP-2含量較炎癥組含量增加，卻無(wú)顯著差異（P＞0.05），而狹窄組MMP-2含量較中度炎癥組升高（P＜0.01），較重度炎癥組降低（P＞0.05）。在UC相關(guān)性異型增生階段，MMP-2含量

14、較炎癥組及狹窄組均明顯增多（P＜0.01），但其表達(dá)較重度炎癥組降低（P＜0.05）。MMP-2含量隨Mayo評(píng)分炎癥活動(dòng)度加重而表達(dá)增加（P＜0.01）。MMP-2含量隨UC病變范圍擴(kuò)大而增加（P＜0.01）。MMP-2在不同發(fā)病類型中含量不同，MMP-2在慢性復(fù)發(fā)型患者體內(nèi)含量較初發(fā)型患者體內(nèi)增多（P＜0.01）。
　　 結(jié)論:TL1A、DcR3、MMP-2、NF-κB與UC病變過(guò)程、病變累及范圍、發(fā)病類型、疾病活動(dòng)度呈正相