粉塵螨抗原免疫治療小鼠結(jié)腸癌的初步研究.pdf

1、結(jié)腸癌是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率和死亡率居高不下,全球每年有120萬(wàn)例新增結(jié)腸癌患者,目前對(duì)結(jié)腸癌的治療仍然以手術(shù)、放療和化療為主。我們研究發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌患者中Treg細(xì)胞比例較正常人高,而在過(guò)敏性疾病患者中Treg細(xì)胞比例較正常人低。本研究使用粉塵螨粗蛋白和Der f2重組蛋白用于治療小鼠結(jié)腸癌模型以及對(duì)治療效果進(jìn)行一系列檢測(cè)。
　　方法:首先制備和鑒定粉塵螨粗蛋白和表達(dá)純化Der f2重組蛋白,摸索建立合適的小鼠結(jié)腸癌模型;

2、制定免疫治療方案后進(jìn)行建模及治療,監(jiān)測(cè)小鼠腫瘤生長(zhǎng)狀況;處死小鼠后,對(duì)小鼠腫瘤進(jìn)行稱重。用流式細(xì)胞的方法檢測(cè)CD8+T細(xì)胞比例及CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞比例;用熒光定量PCR的方法檢測(cè)Foxp3轉(zhuǎn)錄水平;分別用Western-blot印跡雜交和免疫組化檢測(cè)小鼠腫瘤組織內(nèi)Foxp3蛋白水平。
　　結(jié)果:摸索和建立了合適的小鼠結(jié)腸癌模型;成功制備和鑒定了粉塵螨粗蛋白以及表達(dá)純化的Der f2重組蛋白,并用于小鼠結(jié)腸癌

3、模型的治療;經(jīng)過(guò)治療后,治療組小鼠腫瘤生長(zhǎng)速度均減緩,其腫瘤重量均低于未治療組;經(jīng)流式細(xì)胞檢測(cè),治療組小鼠體內(nèi)CD8+T細(xì)胞比例上升,CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞比例下降,與未治療組相比,治療組小鼠體內(nèi)Foxp3轉(zhuǎn)錄水平均明顯減低;Western-blot和免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示治療組小鼠腫瘤中Foxp3蛋白水平均降低。
　　結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明粉塵螨粗蛋白和Der f2重組蛋白均能有效治療小鼠結(jié)腸癌模型,但其分子機(jī)理