惡性胸腔積液中VEGF、MMP-9、CD44和miRNA的表達(dá).pdf

1、目的：本研究通過檢測VEGF、MMP-9和CD44在非小細(xì)胞肺癌合并惡性胸腔積液的表達(dá)水平及miRNA表達(dá)，從分子水平上初步認(rèn)識VEGF、MMP-9、CD44和miRNA與肺癌伴惡性胸腔積液之間的關(guān)系，為惡性胸腔積液的形成機(jī)制及診斷提供部分實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
　　方法：
　　1．通過酶聯(lián)免疫吸附法技術(shù)，分別檢測VEGF、MMP-9和CD44在非小細(xì)胞肺癌伴惡性胸腔積液25例和非癌性胸腔積液16例兩組標(biāo)本的表達(dá)情況，分析其表達(dá)水平與

2、NSCLC不同淋巴結(jié)分期、病理分型的相關(guān)性，以及三個(gè)指標(biāo)的表達(dá)在肺癌伴MPE中是否具有一定的聯(lián)系。
　　2．應(yīng)用基因芯片技術(shù)，分別檢測惡性胸腔積液和良性胸腔積液各1例標(biāo)本的基因譜表達(dá)，利用微陣列分析篩選出差異顯著的miRNA，同時(shí)運(yùn)用熒光定量PCR法對目的基因進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證。
　　結(jié)果：
　　1．VEGF、MMP-9和CD44在惡性胸腔積液和良性胸腔積液中的表達(dá)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p＜0.05）；在惡性胸腔積液中，VEGF

3、、MMP-9和CD44三者之間存在正相關(guān)，而在良性胸腔積液中三個(gè)指標(biāo)無相關(guān)性。在不同病理分型中，VEGF、MMP-9和CD44在肺腺癌的表達(dá)水平高于肺鱗癌（p＜0.005）。不同淋巴結(jié)分期中，VEGF、MMP-9和CD44在N3期的表達(dá)較N2期均有一定的增高趨勢，但統(tǒng)計(jì)學(xué)差異無顯著性（p＞0.05）。
　　2．良惡性胸腔積液基因譜表達(dá)的miRNA微陣列分析得出，表達(dá)差異在2.0倍以上的miRNA有312種，其中表達(dá)上調(diào)的有216種

4、，表達(dá)下調(diào)的有96種。對其中表達(dá)差異顯著的miRNA-423、miRNA-486運(yùn)用熒光定量PCR法進(jìn)行驗(yàn)證，各目的基因的熔解曲線均為單一峰，擴(kuò)增特異性較好，惡性胸腔積液中miR-423的相對表達(dá)量下降，miR-486的表達(dá)則增高。
　　結(jié)論：
　　1. VEGF、MMP-9和CD44在肺癌伴惡性胸腔積液中的表達(dá)增高；與MPE的形成密切相關(guān)；與病理分型、淋巴結(jié)分期存在一定相關(guān)性。三個(gè)指標(biāo)的聯(lián)合檢測對良惡性胸腔積液的鑒別及病理