姜黃素通過調控miR-21-PTEN通路抑制人肺腺癌A549細胞增殖的實驗研究.pdf

1、目的:
　　姜黃素，一種天然植物化學物質，已被證實具有強效抗癌活性，本研究試圖確定姜黃素對于人類非小細胞肺癌細胞的細胞毒作用的分子機制。
　　方法:
　　將不同濃度姜黃素處理人肺腺癌A549細胞48h，光鏡下觀察細胞形態(tài)及增殖情況，使用MTS法檢測其對細胞增殖的影響。qRT-PCR法測定經(jīng)不同濃度的姜黃素處理48h后的A549細胞中microRNA-21的表達情況。使用脂質體轉染法將miR-21 mimic或PTEN的

2、小干擾RNA轉染到A549細胞，使miR-21過表達或PTEN基因沉默，再經(jīng)姜黃素處理48h后，使用Western Blot法檢測A549細胞中PTEN蛋白的表達情況。
　　結果:
　　相較于未經(jīng)姜黃素處理的A549細胞，濃度介于20-40μM之間的姜黃素可以呈濃度依賴性的抑制A549細胞增殖，其抑制效果具有統(tǒng)計學差異(p<0.05)，且以濃度為30μM抑制效果開始明顯顯著(p<0.01)；經(jīng)姜黃素處理過的細胞對microR

3、NA-21的表達產(chǎn)生了一種呈濃度依賴性的抑制效果(p<0.05)。此外，PTEN已被證明為microRNA-21的一個靶點,其蛋白水平由Western Blot法測定，轉染了miR-21 mimic或PTEN小干擾RNA的A549細胞，對比于陰性對照組，其PTEN蛋白水平下降明顯，其差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。而與相應未經(jīng)姜黃素處理組比較，PTEN蛋白水平在經(jīng)姜黃素處理過的A549細胞中明顯升高(p<0.05)。
　　結論