Plk1、Chk1-2在原發(fā)性肝癌組織及HepG2細胞中的表達及臨床意義.pdf

1、目的：研究保羅樣激酶1（Polo-like kinase1，Plk1）、細胞周期檢測點激酶1、2（checkpoint kinase1/2，Chk1/2）三種在細胞周期調(diào)控過程及細胞周期檢測點機制中有重要作用的激酶在原發(fā)性肝癌組織與人肝癌細胞 HepG2中的表達情況，了解這三種激酶蛋白的表達與原發(fā)性肝癌之間的關(guān)系，以期為肝癌的生物基因治療提供理論依據(jù)。
　　方法：（1）使用免疫組織化學(xué)二步法（Envision法）檢測40例原發(fā)性肝

2、癌組織及16例肝非腫瘤組織（正常肝組織8例，肝硬化組織8例）中Plk1、Chk1/2蛋白的表達。（2）培養(yǎng)后收集HepG2細胞并提取蛋白。（3）應(yīng)用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定各組樣品的蛋白濃度。（4）利用蛋白免疫印記（Western-bloting）技術(shù)定性分析Plk1、Chk1/2蛋白在HepG2細胞中的表達情況。（5）用pHotoshop軟件測定灰度值進行定量分析，從而檢驗不同基因蛋白在HepG2細胞中表達的差異。
　　結(jié)果

3、：（1）Plk1、Chk1/2蛋白在原發(fā)性肝癌組織中表達的陽性率分別57.5％、75.0%和22.5%，在肝非腫瘤組織中的陽性率分別為0%，25.0%和56.3%；Plk1和Chk1蛋白在原發(fā)性肝癌組織中的表達陽性率高于肝非腫瘤組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。Chk2在原發(fā)性肝癌組織中的表達陽性率低于肝非腫瘤組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。（2）Plk1、Chk1/2蛋白在HepG2細胞中均有表達。（3）Plk1蛋白與

4、Chk1/2蛋白的相對表達量分別是：0.39±0.0226、0.08±0.0249、0.01±0.0066，且三者之間的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，其表達的順序依次為Plk1>Chk1>Chk2。
　　結(jié)論：（1）Plk1、Chk1蛋白在原發(fā)性肝癌組織中表達上調(diào)，而 Chk2蛋白在原發(fā)性肝癌組織中表達下調(diào)。（2）Plk1、Chk1/2基因作為細胞周期調(diào)控中的重要激酶在HepG2細胞中均有表達，其表達順序為Plk1>Chk1>Chk2。（3