油酰乙醇胺對動脈粥樣硬化發(fā)展進程的作用研究.pdf

1、研究背景:動脈粥樣硬化(AS)是現(xiàn)在世界范圍內(nèi)最普遍存在的嚴重威脅人類健康的心血管疾病之一。隨著肥胖和糖尿病患病人口比例的不斷上升,由動脈粥樣硬化引起的心血管疾病如冠心病(CHD)等已經(jīng)成為全球人口死亡的主要原因。冠狀動脈的粥樣硬化的情況也已經(jīng)成為臨床上考察心血管系統(tǒng)是否健康的重要檢測項目。因此,尋找動脈粥樣硬化藥物的研究成為國內(nèi)外藥物研究的熱點。
　　 很多學者認為,動脈粥樣硬化的發(fā)展進程從童年就已經(jīng)開始了,它緩慢且不易察覺的

2、發(fā)展,直到我們步入中年時才表現(xiàn)出癥狀。肥胖、高血壓、高脂血癥和糖尿病等代謝紊亂疾病是動脈粥樣硬化誘發(fā)的主要因素。而動脈粥樣硬化頑固斑塊一旦形成,則很難將其清除根治。所以,對于動脈粥樣硬化的預防就顯得尤為重要。
　　 PPAR-α能調(diào)控能量代謝、抑制炎癥反應、和保護內(nèi)皮功能,與動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),故而成為防治動脈粥樣硬化的重要研究靶點,目前PPAR-α的合成配體己成為臨床治療心血管疾病的一線藥物。因此,OEA作為PPAR

3、-α的內(nèi)源性配體,其抗動脈粥樣硬化的作用亟待研究。
　　 目的:探討OEA對動脈粥樣硬化發(fā)展進程中各個環(huán)節(jié)的作用、相關(guān)機制及其動物模型中的作用效果。方法:采用ox-LDL誘導HUVEC非正常增值及凋亡、VSMC遷移和巨噬細胞內(nèi)炎性反應;采用大鼠動脈球囊拉傷致粥樣硬化模型及ApoE敲除小鼠動脈粥樣硬化模型;使用Annexin V/PI染色和流式細胞技術(shù)檢測OEA對ox-LDL誘導的內(nèi)皮細胞凋亡的作用;使用CCK-8試劑盒檢測OEA

4、對ox-LDL誘導的內(nèi)皮細胞非正常增值的作用;使用transwell小室檢測OEA對ox-LDL誘導的血管平滑肌細胞遷移的作用;使用熒光定量PCR技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附實驗技術(shù)檢測OEA在體外和體內(nèi)實驗中對PPAR-α、M-CSF、TNF-α、IL-6、iNOS和COX-2等基因mRNA和蛋白表達的影響;使用石蠟切片、H-E染色法檢測OEA對動物模型腹主動脈組織病變的作用;使用油紅O染色法直觀檢測OEA對ApoE敲除小鼠動脈粥樣硬化的作用;

5、使用化學反應試劑盒檢測檢測OEA對動物模型血清中總膽固醇、甘油三酯、LDL、HDL、ox-LDL及TNF-α的作用。結(jié)果:本論文實驗結(jié)果顯示,OEA能夠顯著抑制由ox-LDL誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞的非正常增殖和凋亡;同時,OEA能夠抑制ox-LDL誘導的大鼠血管平滑肌細胞遷移;在巨噬細胞中,ox-LDL能夠誘導TNF-α、CRP、M-CSF、IL-6、iNOS及COX-2的表達升高,PPAR-α表達降低,OEA能夠逆轉(zhuǎn)這些變化,且OEA