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1、該實(shí)驗(yàn)以體外培養(yǎng)的角質(zhì)形成細(xì)胞株colo-16為靶細(xì)胞,將IFN-γ與抗Fas單克隆抗體(AntiFasmab)共同作用于細(xì)胞誘導(dǎo)其凋亡,應(yīng)用流式細(xì)胞儀監(jiān)測(cè)細(xì)胞凋亡的過程,硫代羅丹明B(sulphorhodamine B)方法同步檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制狀況,建立了SRB染色檢測(cè)角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡的方法,并初步探討了人參皂甙對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡的影響,從而為濕疹性皮炎治療藥物的篩選奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).方法:將體外培養(yǎng)角質(zhì)形成細(xì)胞株colo-16與IFN
2、-γ和AntiFasmab單獨(dú)或聯(lián)合培養(yǎng),觀察不同的作用時(shí)間、不同的作用濃度及二者聯(lián)合的最佳凋亡誘導(dǎo)條件下加入Fas-Fc和藥物人參皂甙.將流式細(xì)胞的檢測(cè)用于上述條件下的凋亡產(chǎn)生及其程度同步監(jiān)測(cè);用SRB方法測(cè)定以上條件下細(xì)胞的增殖抑制作用;倒置顯微鏡、熒光顯微鏡直接觀察細(xì)胞表態(tài)學(xué)變化.結(jié)論:(1)角質(zhì)形成細(xì)胞是IFN-γ50ng/ml與AntiFasmablμg/ml共同作用誘導(dǎo)的凋亡.(2)IFN-γ與AntiFasmab共同作用所
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