藍(lán)刺頭的組織培養(yǎng)和植株再生的研究.pdf

1、野生花卉藍(lán)刺頭(Echinops latifolius Tausch.)具有較高的觀賞及應(yīng)用價(jià)值，具有很大的市場(chǎng)潛力，是一種亟待研究開(kāi)發(fā)的新型花卉。本研究在引種馴化藍(lán)刺頭兩年的基礎(chǔ)上，對(duì)其群體進(jìn)行優(yōu)良單株的選擇，并將選出的優(yōu)良單株進(jìn)行根段扦插繁殖。以根段扦插得到的不定芽、葉片為外植體，建立了藍(lán)刺頭的組培快繁和植株再生體系，并對(duì)其中的影響因素進(jìn)行了研究；同時(shí)以根段為外植體對(duì)建立藍(lán)刺頭的再生體系進(jìn)行了嘗試。試驗(yàn)結(jié)果如下： 1．用加權(quán)

2、系數(shù)法對(duì)所選植株進(jìn)行綜合評(píng)分，最終選出符合切花標(biāo)準(zhǔn)的四個(gè)類(lèi)型的優(yōu)良單株L2、L8、L13、L24。 2．建立了以不定芽為外植體的藍(lán)刺頭的組培快繁體系。最適的芽增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0mg·L<'-1>+NAA0.2 mg·L<'-1>，芽增殖系數(shù)達(dá)15.3，平均芽長(zhǎng)為4.2cm；不添加任何植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的MS培養(yǎng)基是藍(lán)刺頭無(wú)菌苗最佳的壯苗培養(yǎng)基；無(wú)菌苗生根以大量元素減半的MS培養(yǎng)基附加0.5 mg·L<'-1>的NAA

3、和1.0 mg·L<'-1>的IBA效果最好。組培苗的移栽基質(zhì)可選擇等比例混合的草炭與河沙。 3．對(duì)以根段為外植體的藍(lán)刺頭的再生體系的研究。結(jié)果表明，藍(lán)刺頭的根內(nèi)生菌多，且有共生菌存在，很難得到完全無(wú)菌的材料。多次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，先用0.1％升汞處理15min，無(wú)菌水沖洗一次，然后用0.1％升汞浸泡15min，相比其它處理可以得到較好的效果。另外，試驗(yàn)表明，2,4-D和KT組合雖然可以產(chǎn)生大量愈傷組織，但這些愈傷卻沒(méi)有芽點(diǎn)分化；根段在

4、3.0mg·L<'-1>6-BA附加0.2或0.8 mg·L<'-1>的NAA組合中可以產(chǎn)生大量疏松的愈傷組織，再經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后產(chǎn)生綠色芽點(diǎn)，但是得到的不定芽玻璃化現(xiàn)象嚴(yán)重，可以在不添加植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的MS培養(yǎng)基中進(jìn)行壯苗。 4．以根插苗葉片為外植體建立了藍(lán)刺頭高效的植株再生體系。結(jié)果表明，基本培養(yǎng)基MS附加6-BA 1.0 mg·L<'-1>及NAA 0.1 mg·L<'-1>是藍(lán)刺頭葉片最適的分化培養(yǎng)基；在最適分化培養(yǎng)基中添加

5、2.0mg·L<'-1>的硝酸銀可以縮短不定芽分化的時(shí)間，提高再生率和分化芽數(shù)；葉片暗培養(yǎng)15d后轉(zhuǎn)到光下，不定芽的再生率也有明顯的提高。在不添加任何植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的MS培養(yǎng)基中對(duì)再生的不定芽培養(yǎng)，壯苗，生根培養(yǎng)基1/2MS+NAA 0.5 mg·L<'-1>+IBA1.0 mg·L<'-1>IBA中生根，然后進(jìn)行煉苗移栽。另試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在添加硝酸銀的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的藍(lán)刺頭葉片表面產(chǎn)生大量的不定芽，而且不定芽生長(zhǎng)健壯；僅在葉片切口處有少