XMRV與中國(guó)前列腺癌人群的相關(guān)性研究.pdf

1、前列腺癌的發(fā)病機(jī)制是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，目前研究表明抗病毒酶RNase LR462Q基因型的突變與歐美人群前列腺癌的發(fā)生具有相關(guān)性。2006年，美國(guó)Urishman等在R462Q突變型的歐裔美國(guó)人前列腺癌組織內(nèi)鑒定到一種新的γ逆轉(zhuǎn)錄病毒--Xenotropic murine leukemia virus-related virus(XMRV)。它是目前為止發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)能夠感染人類(lèi)的γ逆轉(zhuǎn)錄病毒。但是不同實(shí)驗(yàn)室和地區(qū)對(duì)于XMRV與前列腺癌相關(guān)

2、性的研究所得結(jié)論迥異，同時(shí)也有研究發(fā)現(xiàn)XMRV檢測(cè)過(guò)程中存在鼠源污染的問(wèn)題?？紤]到XMRV病毒潛在的醫(yī)學(xué)和社會(huì)影響，本研究考察了中國(guó)前列腺癌人群和健康人群中XMRV的感染情況，同時(shí)考察了R462Q基因型與中國(guó)前列腺癌的相關(guān)性。
　　 實(shí)驗(yàn)方法：
　　 1.采用PCR和傳統(tǒng)Sanger測(cè)序的方法，我們對(duì)240例漢民族獻(xiàn)血者和125例前列腺癌樣本的RNase L R462Q位點(diǎn)的基因分型進(jìn)行鑒定。
　　 2.利用巢式

3、PCR對(duì)170例前列腺癌患者和392例獻(xiàn)血者進(jìn)行XMRV序列的檢測(cè)分析及全基因組擴(kuò)增；qPCR檢測(cè)病毒拷貝數(shù)；Western Blot和血漿-LNCap共培養(yǎng)檢測(cè)病毒蛋白及感染能力。
　　 3.同時(shí)用mtDNA PCR方法篩查鼠基因組污染。
　　 結(jié)果：
　　 1.R462Q位點(diǎn)Q的基因頻率在漢民族健康獻(xiàn)血者中為20.2％，在前列腺癌患者中為17.2％。
　　 2.通過(guò)巢式PCR在5例前列腺癌和5例獻(xiàn)血者

4、樣本中檢測(cè)到鼠內(nèi)生性逆轉(zhuǎn)錄病毒(mouse endogenous retrovirus，mERVs)片段，這些片段的堿基序列與已知XMRV相應(yīng)序列有不同程度的差異，但沒(méi)有檢測(cè)到病毒全基因組；qPCR分析顯示陽(yáng)性樣本中mERV拷貝數(shù)目極低；同時(shí)Western Blot和血漿-LNCap共培養(yǎng)均沒(méi)有檢測(cè)到XMRV蛋白信號(hào)。
　　 3.采用mtDNAPCR的方法在2例獻(xiàn)血者樣本中檢測(cè)到鼠基因組污染。
　　 結(jié)論：本研究結(jié)果表明