TRPA1在加巴噴丁治療神經(jīng)病理性疼痛中的作用.pdf

1、目的：通過觀察TRPA1在加巴噴丁(gabapentin，GBP)治療神經(jīng)病理性疼痛大鼠模型背根神經(jīng)節(jié)(DRG)中表達的變化及鞘內(nèi)注射GBP后大鼠神經(jīng)病理性疼痛行為學(xué)表現(xiàn)的變化和其對腰段脊髓炎性細胞因子表達的影響，探討TRPA1在GBP治療神經(jīng)病理性疼痛中的作用，以及GBP其可能的作用機制。
　　方法：成年雄性Sprague-Dawley大鼠隨機分為為假手術(shù)組(Sham)、CCI組、NS+ CCI組、GBP10+ CCI組、GBP

2、30+ CCI組及GBP100+ CCI組(n=8)。造模后14天，NS+CCI組給予生理鹽水10μl，GBP10+CCI組、GBP30+CCI組及GBP100+CCI組分別鞘內(nèi)注射加巴噴丁10μg/10μl、30μg/10μl、100μg/10μl。各組于術(shù)前1d、給藥前1h、給藥后2、4、6、8h分別測定機械縮足閾值(Mechanicalwithdrawl threshold MWT)和熱縮足潛伏期(Thermal withdraw

3、al latency TWL)。給藥后9h取大鼠腰段脊髓，檢測腫瘤壞死因子α(tumor hecrosing factorα，TNF-α)、白細胞介素(interleukin，IL)-6、IL-10的表達和腰段脊髓NF-κB的表達。同時，我們選取Sham組、CCI組、NS+CCI組以及GBP100+ CCI組，應(yīng)用熒光定量PCR技術(shù)，觀察TRPA1在脊髓背根神經(jīng)節(jié)表達的改變。
　　結(jié)果：
　　一行為學(xué)表現(xiàn)
　　各組手術(shù)

4、前1d的MWT與TWL差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。Sham組手術(shù)前后各時間點的MWT與TWL差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。與Sham組相比，CCI組、NS+CCI組、GBP10+CCI組、GBP30+CCI組以及GBP100+CCI組術(shù)后MWT與TWL均下降（P＜0.01）。與CCI組相比，GBP10+CCI組MWT與TWL在給藥后2、4h，GBP30+CCI組在給藥后2、4、6h，GBP100+CCI組在給藥后2、4、6、8

5、h，MWT與TWL上升(P＜0.05）。與GBP10+CCI組、GBP30+CCI組相比，GBP100+CCI組在給藥后2、4、6、8h MWT與TWL均上升(P＜0.05）。
　　二 ELISA測定細胞因子
　　2.1腰段脊髓TNF-α、IL-6、IL-10表達與Sham組比，CCI組、NS+CCI組、GBP10+ CCI組、GBP30+CCI組及GBP100+CCI組的腰段脊髓TNF-α、IL-6及IL-10表達上升(P

6、＜0.05)。與CCI組相比，GBP100+CCI組腰段脊髓TNF-α、IL-6表達下降，IL-10表達上升(P＜0.01); GBP30+CCI組腰段脊髓TNF-α、IL-6表達下降，IL-10表達上升(P＜0.05); GBP10+CCI組腰段脊髓TNF-α、IL-6、IL-10則無明顯變化（P＞0.05）。
　　2.2腰段脊髓NF-κB的表達與Sham組比，CCI組、NS+ CCI組、GBP10+CCI組、GBP30+CCI

7、組及GBP100+CCI組腰段脊髓NF-κB表達上升，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。與CCI組相比，GBP30+CCI組及GBP100+CCI組脊髓NF-κB表達下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05); GBP10+CCI組腰段脊髓NF-κB表達無明顯變化(P＞0.05）。
　　三熒光定量PCR
　　與Sham組比，CCI組、NS+CCI組及GBP100+CCI組TRPA1表達上升，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。與C

8、CI組相比，GBP100+CCI組TRPA1表達下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。CCI組與NS+CCI組相比，表達無明顯變化（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　一、加巴噴丁可有效治療大鼠CCI后神經(jīng)病理性疼痛，其鎮(zhèn)痛機制可能與降低脊髓NF-κB表達，抑制脊髓TNF-α及IL-6表達，增強IL-10表達相關(guān)。
　　二、確定神經(jīng)病理性疼痛模型建立成功。神經(jīng)病理性疼痛條件下，背根神經(jīng)節(jié)TRPA1表達增多，并與神經(jīng)病理