胚胎胰組織移植器官形成的實驗研究.pdf

1、目的：目前使用胰島移植或胰腺移植治療糖尿病，但供移植的胰腺來源嚴重短缺，因此需要進一步開拓可供移植的胰腺來源。本課題將探討胚胎胰組織在同種異體內(nèi)重新血管化并再生長發(fā)育的可能性，以及影響其發(fā)育的因素。 方法：實驗采用遠交系SD大鼠和近交系Lewis大鼠分別建立同種胚胰移植模型。將遠交系SD大鼠妊娠15.5天(E15.5)，E16.5，E17.5和E18.5的胚胰分別移植到成年健康同種SD大鼠的腎包膜下和網(wǎng)膜內(nèi)，移植后2～3周期間開

2、腹觀察器官形成情況，并取標本行病理切片和免疫組化檢查，根據(jù)結(jié)果選擇適合移植的胎齡。將Lewis大鼠妊娠14.5天(E14.5)和妊娠15.5天(E15.5)的胚胰分為2組分別移植到成年健康Lewis大鼠的腎包膜下和網(wǎng)膜內(nèi)，移植后3周和6周分別開腹觀察器官形成情況，并取標本病理切片觀察，行免疫組化半定量和定位。結(jié)果：遠交系SD大鼠同種移植組中，(1)E15.5胚胰植入腎包膜下3周后，發(fā)育良好，腺泡導(dǎo)管分化發(fā)育，β細胞增殖并聚集，輕度排斥反

3、應(yīng)。植入網(wǎng)膜內(nèi).2.5周后，即有中度排斥反應(yīng)，發(fā)育有限。(2)E16.5胚胰移植后第2.5周，可見中度排斥反應(yīng)，但結(jié)構(gòu)發(fā)育較好。(3)E17.5，E18.5胚胰植入腎包膜下后，2.5周內(nèi)就發(fā)生重度排斥反應(yīng)，生長嚴重受限，β細胞未見增殖。 近交系Lewis大鼠同種移植組中，(1)胚胰移植入腎包膜下3周后，E14.5和E15.5胚胰體積均會增大約10～15倍，外分泌部分腺泡導(dǎo)管分化發(fā)育，β細胞大量增殖，形成胰島，且分泌胰島素功能正常

4、，抗胰島素免疫組化陽性染色的內(nèi)分泌胰島β細胞團面積分別為53605.9±15153.8um2和109024.1±31413.5um2。組織周圍可見新生血管。(2)植入腎包膜下6周后，E14.5胚胰內(nèi)分泌部分面積為174025.2±38702.5um2，進一步增殖(P＜0.05)，E15.5胚胰內(nèi)分泌部分面積為127479.2±35117.4um2，未見增殖(P＞0.05)，外分泌部分均有纖維化表現(xiàn)，內(nèi)分泌部分跟外分泌部分有分離趨勢。(3

5、)植入網(wǎng)膜內(nèi)3周后，胚胰體積增大，β細胞也增殖形成胰島，E15.5胚胰陽性染色的內(nèi)分泌胰島細胞團面積為20831.6±11480.1um2。但無論是體積增大還是β細胞的增殖都沒有腎包膜下移植的胚胰顯著(P＜0.05)。 結(jié)論：(1)不使用免疫抑制劑時，一定胎齡的胚胰可以在同種遠交系和近交系成年大鼠體內(nèi)再血管化，并發(fā)育分化為近似正常胰腺組織。此后見內(nèi)分泌胰島的選擇性分化。(2)E14.5，E15.5的胚胰用來移植比較適合，排斥反應(yīng)