急性肺損傷新生大鼠肺上皮細胞內(nèi)鈣離子與肺表面活性蛋白A變化的研究.pdf

1、目的：本研究擬采用內(nèi)毒素(LPS)腹腔注射的方法復制新生大鼠急性肺損傷(ALI)模型,動態(tài)觀察新生大鼠肺上皮細胞[Ca2+]i及血清、支氣管肺泡灌洗液(BALF)中肺表面活性物質(zhì)蛋白A(SP-A)的變化趨勢,以探討鈣超載、SP-A在ALI/ARDS發(fā)病機制中的作用,以及血清、BALF中SP-A的檢測在ALI/ARDS早期診斷中的價值。 方法：選擇6～7日齡的SD大鼠64只,隨機分為8組,其中肺損傷組(ALⅠ組)采用腹腔注射LPS

2、誘導建立ALI模型,按注射后0.5、1、2、4、8、16、24h等時間點分為7組,每組8只；對照組給予腹腔注射等量的生理鹽水,共8只。檢測對照組和ALI各組新生大鼠肺組織濕/干重比值(W/D比值),并觀察肺組織病理學改變。應(yīng)用熒光測定法檢測肺上皮細胞[Ca2+]i的水平,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清、BALF中的SP-A水平。 結(jié)果： 1.與對照組比較,ALI各組新生大鼠肺組織均可見不同程度的肺組織充血,注射

3、LPS 24h時可見斑片狀出血壞死灶。 2.ALⅠ組各時間點的病理切片順序出現(xiàn)由輕到重的肺間質(zhì)水腫、炎性細胞浸潤、肺泡出血等改變。 3.ALⅠ組的W/D比值在LPS注射后0.5h已明顯高于對照組(P<0.05),4h時達高峰,隨后有所下降。 4.ALⅠ組的肺上皮細胞[Ca2+]i隨著病程的進展呈逐漸升高的趨勢,2h時開始[Ca2+]i己顯著高于對照組(P<0.05),至8h時達高峰,之后雖略有下降,但仍明顯高于對

4、照組(P<0.05)。 5.ALⅠ組血清SP-A水平在1 h已明顯高于對照組(P<0.05),8h時達高峰值,之后雖略有下降,但仍明顯高于對照組(P<0.05)。 6.ALI各組BALF中的SP-A水平與對照組相比,有下降趨勢,但無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 結(jié)論： 1.新生大鼠注射LPS后,肺組織W/D比值升高,病理切片可見肺間質(zhì)水腫、炎性細胞浸潤、肺泡出血等,均符合ALI改變,說明采用LPS復制AL