纈沙坦對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖、遷移及p-ERK1-2、p-P38表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀察纈沙坦對(duì)血管緊張素II刺激下大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖與遷移及p-ERK1/2、p-P38表達(dá)的影響。
　　 方法:組織貼塊法培養(yǎng)RASMCs，建立RASMCs體外培養(yǎng)模型，取3～5代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分為：正常對(duì)照組、AngII組、AngII＋Val（10-3、10-4、10-5 mol/l）組、AngII＋PD98059（10-5mol/l）組、AngII＋SB23015（10-5 mol/l）組、Val（10-

2、3mol/l）組，AngII的濃度均為10-6 mol/l。采用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法(MTT法)檢測(cè)Val對(duì)AngII誘導(dǎo)下細(xì)胞增殖的影響，采用劃痕試驗(yàn)法(Pipettetip wounding injury)進(jìn)行細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)，采用Western Blot法檢測(cè)VSMCs中ERK1/2、p- ERK1/2、P38、p- P38表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 （1）與對(duì)照組(未加藥組)相比，AngII能明顯促進(jìn)VSM

3、Cs的增殖。AngII促進(jìn)VSMCs增殖的作用能被Val和PD98059所抑制，并且Val在10-5～10-3mol/l條件下呈濃度依賴性抑制VSMCs增殖，以10-3 mol/l作用最為顯著。SB23015能明顯促進(jìn)VSMCs增殖。
　　 （2）劃痕試驗(yàn)結(jié)果表明，細(xì)胞經(jīng)AngII作用后，遷移活性明顯增加，AngII作用于細(xì)胞24h，VSMCs遷移活性是對(duì)照組的1.29倍(217.7um vs 168.0um)。Val及PD98

4、059抑制AngII誘導(dǎo)的大鼠VSMCs的遷移，但SB23015作用與之相反(241.7um vs 217.7um)。
　　 （3）Val和PD98059能抑制AngII的促VSMCs胞內(nèi)p-ERK1/2表達(dá)的作用，而SB23015則能增強(qiáng)這種作用(2.27 vs 2.11)。Val和SB23015能抑制AngII的促VSMCs胞內(nèi)p-P38表達(dá)的作用，而PD98059則對(duì)此無(wú)顯著影響(2.84 vs 2.81)。
　　

5、 （4）Val單獨(dú)作用于VSMCs時(shí)，對(duì)細(xì)胞的增殖、遷移及p-ERK1/2、p-P38的表達(dá)均無(wú)明顯影響。
　　 結(jié)論:
　　 （1）Val在10-5～10-3mol/l條件下呈濃度依賴性抑制AngII誘導(dǎo)VSMCs的增殖和遷移。
　　 （2）Val抑制AngII誘導(dǎo)VSMCs的增殖和遷移與其抑制AngII誘導(dǎo)的p-ERK1/2的表達(dá)相關(guān)。
　　 （3）p-P38對(duì)AngII誘導(dǎo)的p-ERK1/ 2 的激