激光掃描共聚焦顯微鏡對馬拉色菌等真菌自發(fā)熒光的生物學(xué)特性研究.pdf

1、目的：①研究臨床常見致病真菌馬拉色菌、念珠菌、絲狀菌等在紫外光照射下的自發(fā)熒光特性；②探討真菌在酸堿性環(huán)境中、存活和死亡狀態(tài)下自發(fā)熒光質(zhì)和量的變化規(guī)律；③建立真菌自發(fā)熒光檢測、記錄的最佳條件；④探討通過檢測真菌的自發(fā)熒光進(jìn)行真菌病早期、快速診斷的可行性。 方法：選用糠秕馬拉色菌和日本馬拉色菌2株標(biāo)準(zhǔn)菌，接種在Dixon培養(yǎng)基32℃培養(yǎng)，分別在培養(yǎng)的第2、4、6、8、10天挑取菌落放在TCS-SP2型激光掃描共聚焦顯微鏡(Leic

2、a TCS-SP2 LSCM)下觀察、測定其自發(fā)熒光；分別用3％戊二醛溶液、pH4.0鹽酸溶液、10％氫氧化鉀溶液、1280ug/mL和64ug/mL氟康唑溶液、0.3％美藍(lán)溶液處理后觀察馬拉色菌自發(fā)熒光的變化；選擇白念珠菌、申克孢子絲菌、紅色毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌、土曲霉、煙曲霉等用沙堡葡萄糖瓊脂培養(yǎng)后觀察其自發(fā)熒光的特點(diǎn)。 結(jié)果：糠秕馬拉色菌和日本馬拉色菌2株標(biāo)準(zhǔn)株的自發(fā)熒光強(qiáng)度分別在培養(yǎng)第4和8天時最強(qiáng)，菌落的自發(fā)熒光在1小時

3、內(nèi)逐漸減弱；3％戊二醛溶液、pH4.0鹽酸溶液、1280 ug/mL和64ug/mL氟康唑溶液、3％美藍(lán)溶液處理后馬拉色菌自發(fā)熒光都增強(qiáng)，10％氫氧化鉀溶液中的馬拉色菌在開始時熒光增強(qiáng)，2天后減弱；白念珠菌、申克孢子絲菌、紅色毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌、土曲霉、煙曲霉等在培養(yǎng)條件下有自發(fā)熒光，但都較馬拉色菌弱。 結(jié)論：①不同菌屬、不同菌株的自發(fā)熒光不相同；②同一菌株在相同培養(yǎng)條件下不同時間自發(fā)熒光不同；③弱酸性和弱堿性環(huán)境可使馬拉色菌的