外源NO影響花楸樹胚胎萌發(fā)生理機(jī)制研究.pdf

1、本研究以花楸樹成熟合子胚胎為材料，利用室內(nèi)培養(yǎng)皿發(fā)芽法分析了外源一氧化氮供體(SNP)、NO清除劑(PTIO和cPTIO)、脫落酸(ABA)、乙烯利及乙烯受體抑制劑(NBD)對(duì)花楸樹胚胎萌發(fā)及萌發(fā)過程中胚胎內(nèi)源乙烯釋放量、活性氧積累、抗氧化酶活性等的影響。研究結(jié)果為了解NO在花楸樹胚胎休眠解除與萌發(fā)中的作用及其作用機(jī)制提供了科學(xué)依據(jù)。研究結(jié)果如下:
　　(1)外源NO供體硝普鈉(SNP)及NO清除劑（PTIO和cPTIO）處理花楸

2、樹胚胎，觀察萌發(fā)情況，結(jié)果表明:0～5 mmol·L-1SNP處理可促進(jìn)花楸樹胚胎萌發(fā)，且隨著SNP處理濃度增加萌發(fā)率先增加后減小;2 mmol·L-1 SNP處理的胚胎萌發(fā)效果最佳;各種SNP處理均可使胚胎萌發(fā)率、平均發(fā)芽速度、發(fā)芽指數(shù)、發(fā)芽勢高于對(duì)照;NO清除劑顯著抑制了胚胎萌發(fā);SNP可顯著減弱PTIO對(duì)胚胎萌發(fā)的抑制作用。
　　(2) SNP與ABA和乙烯利處理花楸樹胚胎，觀察萌發(fā)情況，結(jié)果表明:3.0μmol·L-1AB

3、A抑制了胚胎萌發(fā)，而2 mmol·L-1SNP與ABA復(fù)合處理后胚胎的萌發(fā)率、平均發(fā)芽速度、發(fā)芽指數(shù)、發(fā)芽勢均顯著提高。乙烯利具有促進(jìn)花楸樹胚胎萌發(fā)的效果，而NBD與對(duì)照相比顯著抑制了萌發(fā);SNP與NBD組合處理的各個(gè)指標(biāo)與NBD處理無顯著差異，說明SNP不能改變NBD對(duì)胚胎萌發(fā)的抑制作用。
　　(3)利用氣相色譜法檢測花楸樹胚胎內(nèi)源乙烯釋放量，結(jié)果表明:SNP處理可顯著提高乙烯釋放量;NO清除劑顯著抑制了乙烯釋放;SNP可顯著減

4、弱PTIO對(duì)胚胎萌發(fā)過程中乙烯釋放的抑制作用。不同處理中乙烯釋放量順序:SNP＞SNP+cPTIO(或SNP+PTIO)＞cPTIO(或PTIO)。
　　(4) SNP處理花楸樹胚胎對(duì)胚胎內(nèi)活性氧積累有顯著影響。SNP可顯著降低胚胎及幼苗內(nèi)丙二醛(MDA)、超氧陰離子含量，增加過氧化氫含量;NO清除劑(PTIO)的處理效果則相反;PTIO對(duì)活性氧的作用可被SNP減弱。
　　(5)對(duì)花楸樹胚胎中可溶性蛋白質(zhì)含量、超氧化物岐化酶

5、(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性測定結(jié)果表明:SNP可顯著提高細(xì)胞內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)和谷胱甘肽(GSH)含量，增強(qiáng)SOD、CAT、GSH-PX活性;而PTIO則作用相反，當(dāng)SNP和PTIO復(fù)合處理花楸樹胚胎時(shí)，顯著減弱了PTIO的作用。
　　綜上所述，適當(dāng)濃度SNP處理可促進(jìn)花楸樹胚胎萌發(fā)。NO清除劑對(duì)花楸樹胚胎萌發(fā)的抑制效應(yīng)可被SNP預(yù)處理逆轉(zhuǎn)。SNP可緩解ABA對(duì)胚胎萌