植物根系胞外酶原位顯色新方法的建立.pdf

1、土壤酶是土壤中活躍的有機(jī)成分，它主要是由微生物和植物的分泌以及生物的殘?bào)w分解產(chǎn)生，其主要作用是分解土壤內(nèi)的有機(jī)成分，使植物更容易吸收，防御病原菌的侵害，以及促進(jìn)碳氮磷等元素的循環(huán)，是生態(tài)環(huán)境中重要的一份子。本試驗(yàn)為了能更好的保持植物根際原位面，自主設(shè)計(jì)了適宜植物根系胞外酶研究的單側(cè)觀察可拆卸式植物根箱設(shè)備;建立了新的植物根系胞外酶原位顯色方法;利用新的胞外酶原位顯色方法，針對(duì)原位、動(dòng)態(tài)的地下環(huán)境，對(duì)土壤中胞外酶的范圍及活性進(jìn)行定量分析，

2、對(duì)植物互作和氮素施加兩種處理進(jìn)行酶活測(cè)定，判斷該顯色方法的準(zhǔn)確性和應(yīng)用性。主要結(jié)果如下:
　　1.本試驗(yàn)自主設(shè)計(jì)了單側(cè)觀察可拆卸式植物根箱設(shè)備。該設(shè)備采用了滑道插入式設(shè)計(jì)，利用PVC板材進(jìn)行了根箱四壁的加厚設(shè)計(jì)，以及在根箱內(nèi)部采用了有機(jī)玻璃板。該設(shè)備的滑道設(shè)計(jì)能有效地避免水土從接縫處流失并且易于取下，雙層有機(jī)玻璃板能保護(hù)并形成良好的植物根際原位面，為原位測(cè)定植物根系胞外酶提供了良好的樣品。
　　2.建立了原位酶活顯色的新方法

3、，該方法利用瓊脂糖凝膠作為熒光物的顯色媒介，選用302nm波長(zhǎng)的紫外光作為檢測(cè)波長(zhǎng)，特異性的熒光底物濃度為1.5mg/mL。與原有的顯色方法相比，該方法的顯色效果更清晰、范圍更明顯，觀測(cè)及數(shù)據(jù)獲取更為方便。
　　3.通過(guò)10cm2面積的凝膠，采用新的原位顯色方法對(duì)α-淀粉酶、β-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶和幾丁質(zhì)酶進(jìn)行測(cè)定，確定底物充足時(shí)的用量，獲得了良好的熒光圖像，證明新建立的胞外酶原位顯色方法是可行且有效的。
　　4.利用