山羊腸神經(jīng)系統(tǒng)與腸相關(guān)淋巴組織的發(fā)育及交感神經(jīng)對腸黏膜免疫的調(diào)節(jié)機制研究.pdf

1、本試驗利用常規(guī)組織學(xué)、組織化學(xué)、免疫組織化學(xué)、DiI逆行追蹤、透射電鏡和神經(jīng)損毀試驗等技術(shù)，對15日齡和2、4、6、12月齡山羊腸神經(jīng)系統(tǒng)(ENS)和腸相關(guān)淋巴組織(GALT)、腸黏膜免疫相關(guān)細胞的形態(tài)發(fā)育和分布進行了比較研究，以及以小鼠為試驗動物模型，檢測了交感神經(jīng)對腸黏膜免疫功能調(diào)節(jié)的作用機制。主要研究結(jié)果如下： 1) 山羊小腸ENS包括肌間神經(jīng)叢和黏膜下神經(jīng)叢。神經(jīng)叢中神經(jīng)元胞體聚集成神經(jīng)節(jié)，并通過節(jié)間束連成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。乙酰

2、膽堿酯酶(AchE)陽性神經(jīng)元廣泛分布于肌間神經(jīng)叢和黏膜下神經(jīng)叢，一氧化氮合酶(NOS)陽性神經(jīng)元主要分布于肌間神經(jīng)叢，黏膜下神經(jīng)叢內(nèi)NOS陽性神經(jīng)元稀疏，散在分布；肌間神經(jīng)叢、黏膜下神經(jīng)叢中有少量的5-HT、VIP、SP陽性神經(jīng)元胞體分布，小腸黏膜固有層中也偶見有5-HT陽性神經(jīng)元。 2) 15日齡山羊ENS中已經(jīng)具有復(fù)雜而有序的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，2月齡時山羊ENS中的神經(jīng)元發(fā)育基本成熟。肌間神經(jīng)叢中NOS陽性神經(jīng)元核質(zhì)比隨年齡增

3、長而減小，分別為0.52(15日齡)、0.34．(2月齡)、0.32(4月齡)、0.33(6月齡)和0.28(12月齡)，且小腸前段肌間神經(jīng)叢神經(jīng)元的發(fā)育早于小腸后段。 3) 隨著山羊小腸的發(fā)育，肌間神經(jīng)叢中NO能神經(jīng)元和膽堿能神經(jīng)元的數(shù)量逐漸增多而密度逐漸下降。AchE神經(jīng)元數(shù)量在2月齡之前快速增長，2月齡比15目齡總數(shù)增加了112.76％：NOS陽性神經(jīng)元數(shù)量在4月齡之前快速增加，4月齡比15日齡增加了118.28％；此后神

4、經(jīng)元數(shù)量增加速度相對平穩(wěn)。小腸中NOS和AchE陽性神經(jīng)元密度以回腸最高，空腸中神經(jīng)元總數(shù)最多。 4) 15目齡山羊回腸Peyer's結(jié)已經(jīng)具有成熟的淋巴濾泡樣結(jié)構(gòu)。Peyer's結(jié)中淋巴濾泡的數(shù)量和面積隨著年齡的增長而增加，在4月齡達到最大，此后濾泡退化，數(shù)量和面積逐漸減小，到12月齡僅在回腸末段有淋巴濾泡分布。隨著Peyer's結(jié)淋巴濾泡的退化，非典型濾泡(AILF)的比例上升。 5) 15目齡山羊M細胞已經(jīng)基本成熟

5、。M細胞胞質(zhì)中終末網(wǎng)不發(fā)達，頂部有許多細絲，有許多空泡樣的吞飲小泡，線粒體較多，線粒體嵴明顯，含有較多的多泡體，溶酶體少，也可見粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。隨著年齡的增長，M細胞體積增大，表面微皺褶形成；細胞胞質(zhì)內(nèi)線粒體、多泡體增多，連接復(fù)合體也增多。 6) 15日齡山羊小腸上皮內(nèi)淋巴細胞(IEL)數(shù)量很少，為6.21±1.90/100個柱狀上皮細胞。隨著年齡的增長IEL數(shù)量增加，且在2月齡之前和6月齡之后增加速度快，分別增加77.3％和53.

6、95％(P<0.05)，2月齡到6月齡之間IEL數(shù)量平穩(wěn)增加；濾泡相關(guān)上皮(FAE)中的IEL也表現(xiàn)出同樣的趨勢，隨年齡增長而增加， 6月齡達到最大。從十二指腸到回腸，腸絨毛的IEL的數(shù)量逐漸減少，回腸末段FAE中IEL的數(shù)量明顯增多。FAE中IEL數(shù)量高于腸絨毛的IEL數(shù)量。 7) 隨著年齡的增長，山羊小腸肥大細胞(MC)的平均密度呈增加的趨勢，從2.13到44.53個/mm<'2>?；啬cPeyer's結(jié)淋巴濾泡中MC細胞密度

7、在6月齡達到高峰。淋巴濾泡中的MC密度高于小腸其他部位。 8) 腹腔注射交感神經(jīng)阻斷劑6-OHDA損毀腸交感神經(jīng)后，腸黏膜受損，回腸絨毛和FAE的IEL數(shù)量減少，分別比對照組減少了13.57％和28.48％(P<0.01)。 9) 腸損毀交感神經(jīng)后，回腸和Peyer's結(jié)內(nèi)的IgA+細胞數(shù)量略有增加，分別比對照組高13.88％和17.70％；回腸和Peyer's結(jié)內(nèi)的CD4<'+>和CD8<'+>T淋巴細胞的數(shù)量降低，比