青嵐湖五種淡水蚌的群體遺傳多樣性及三角帆蚌微衛(wèi)星DNA的分離.pdf

1、利用北美Epioblasma capsaeformis和中歐Margaritifera margaritifera L.兩種淡水雙殼類(lèi)的20對(duì)微衛(wèi)星引物對(duì)江西青嵐湖五種淡水蚌群體的基因組DNA進(jìn)行了PCR擴(kuò)增,篩選出8對(duì)多態(tài)性較高的引物,并用這8個(gè)微衛(wèi)星座位分別對(duì)三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)、褶紋冠蚌(Cristaria plicata)、洞穴麗蚌(Lamprotula caveata)、射線(xiàn)裂脊蚌(Schistod

2、esmus lampreyanus)和中國(guó)尖嵴蚌(Acuticosta chinensis)五種蚌類(lèi)群體的等位基因頻率、遺傳雜合度、有效等位基因數(shù)、多態(tài)信息含量等進(jìn)行了遺傳多樣性分析,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)遺傳距離對(duì)這五種蚌進(jìn)行了聚類(lèi)分析。并進(jìn)一步利用PCR法分離了三角帆蚌的微衛(wèi)星標(biāo)記。主要研究結(jié)果如下:
　　 1、五種蚌類(lèi)群體的平均等位基因數(shù)為2.8750～4.000,平均觀測(cè)雜合度(Ho)為0.4417～0.6333,平均期望雜合度(He

3、)為0.4430～0.5706,平均多態(tài)信息含量(PIC)為0.368～0.498,五種蚌類(lèi)群體表現(xiàn)出較高的遺傳多樣性。
　　 2、有多個(gè)座位在不同蚌類(lèi)群體中偏離哈代-溫伯格平衡。微衛(wèi)星位點(diǎn)Ecap6和MarMa3116僅在射線(xiàn)裂脊蚌中擴(kuò)增出單一條帶,可以作為鑒定射線(xiàn)裂脊蚌的特異性微衛(wèi)星標(biāo)記。
　　 3、五種蚌類(lèi)群體間的遺傳距離在0.6228與1.4724之間,三角帆蚌和褶紋冠蚌之間的遺傳距離最大,射線(xiàn)裂脊蚌和洞穴麗蚌之

4、間的遺傳距離最小。
　　 4、用PCR法從三角帆蚌基因組DNA中篩選微衛(wèi)星切實(shí)可行,而且避免了同位素污染,一般實(shí)驗(yàn)室即可滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)條件。
　　 5、運(yùn)用PCR法在三角帆蚌的小片段基因組文庫(kù)中能快速篩選含微衛(wèi)星序列的重組陽(yáng)性克隆,對(duì)篩選得到的31個(gè)陽(yáng)性克隆進(jìn)行測(cè)序,結(jié)果獲得33個(gè)微衛(wèi)星序列,其中perfect(完美型)25個(gè),占75.8％；imperfect(非完美型)5個(gè),占15.1％；compound(混合型)3個(gè),占9