鹽酸羅格列酮鈉對RIN-m細(xì)胞高糖損害干預(yù)作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的:研究噻唑烷二酮類藥物(TZDs)一鹽酸羅格列酮鈉(RSG)對β細(xì)胞高糖損害的干預(yù)作用及其機(jī)制。 方法:RIN-m細(xì)胞(系射線誘導(dǎo)的大鼠胰島細(xì)胞瘤，可以分泌胰島素、少量胰高糖素及生長激素)在含無糖型RPMI 1640、10％的胎牛血清常規(guī)培養(yǎng)。采用生理濃度葡萄糖(NG)、NG+鹽酸羅格列酮鈉、高濃度葡萄糖(HG)、HG+不濃度鹽酸羅格列酮鈉培養(yǎng)RIN-m細(xì)胞。以放射免疫法檢測胰島素分泌水平。以流式細(xì)胞儀及TUNEL法檢測RI

2、N-m細(xì)胞凋亡。同時(shí)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色，半定量分析Bcl-2和Bax的表達(dá)。RT-PCR檢測胰腺十二指腸同源盒-1(PDX-1)和胰島素mRNA表達(dá)。 結(jié)果: 1.β細(xì)胞的胰島素分泌功能結(jié)果提示 (1)長期高糖培養(yǎng)引起RIN-m細(xì)胞胰島素分泌水平降低。長期高糖作用使RIS-m細(xì)胞胰腺十二指腸同源盒-1(PDX-1)及胰島素mRNA的表達(dá)水平顯著下降。 (2) 鹽酸羅格列酮鈉(RSG)早期干預(yù)可以增加高糖環(huán)

3、境下RIN-m細(xì)胞胰島素的分泌水平。RSG早期干預(yù)可以顯著上調(diào)高糖環(huán)境下RIN-m細(xì)胞PDX-1及胰島素mRNA的表達(dá)水平。 2.β細(xì)胞的凋亡研究結(jié)果提示 (1)長期高糖可以導(dǎo)致RIN-m細(xì)胞在葡萄糖刺激后胰島素分泌功能下降、凋亡率增加2.7倍。RSG可以增加高糖環(huán)境下RIN-m細(xì)胞胰島素的分泌、降低RIN-m細(xì)胞凋亡率。 (2)長期高糖可以降低RIN-m細(xì)胞Bcl-2/Bax的比例并下調(diào)PDX-1mRNA表達(dá)。