豬血綜合利用的研究.pdf

1、本論文就豬血為原料同時(shí)提取血紅素、超氧化物歧化酶、凝血酶并回收珠蛋白的工藝進(jìn)行了較為深入的研究，結(jié)果如下：
　　 1.確立了超聲破碎溶血的方法及最佳條件為：功率400W，10min，紅細(xì)胞破碎率達(dá)100％；
　　 2.采用濃鹽酸與丙酮的體積比為1:100的酸化丙酮提取血紅素，在同時(shí)提取血紅素、超氧化物歧化酶的條件下，1L全血能得到純度高達(dá)99.9％的血紅素6.0g。
　　 3.采用熱變性法純化SOD，并確立最佳變

2、性溫度為60℃。確定了50％飽和度硫酸銨鹽析去除雜蛋白，90％飽和度硫酸銨鹽析得到SOD粗酶樣品的方法，并通過(guò)中空纖維膜超濾濃縮5倍得到SOD純品。該工藝條件下，1L全血可提取SOD50.1mg，比活達(dá)6523U·mg-1，活力回收達(dá)71％，純化倍數(shù)108.3。經(jīng)SDS-PAGE電泳驗(yàn)證為單一的譜帶，其分子量為32KDa。
　　 4.以生理鹽水配制的凝血酶原溶液，以CaCl2溶液為激活劑時(shí)，其最適激活條件為：溶液中Ca2-濃度為

3、0.1mol·L-1、室溫下激活時(shí)間1.5h。
　　 5.采用DEAE-Sephrose陰離子交換柱層析純化凝血酶，最終1L血能得到凝血酶2.05mg比活達(dá)到1810.2U·mg-1。，活力回收達(dá)49.7％，純化倍數(shù)31.5。所得凝血酶經(jīng)SDS-PAGE電泳驗(yàn)證為電泳純，其分子量為33，580Da，等電聚焦電泳測(cè)定其等電點(diǎn)為5.5左右。且血漿經(jīng)－20℃冷凍處理其分離效果明顯優(yōu)于末處理血漿。
　　 6.回收了血紅蛋白中的珠