整合素ανβ6在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文整合素ανβ6在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)及臨床意義姓名：郭燕紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：吳小華蘇杏滿2003.3.1中文摘要理特征及預(yù)后的關(guān)系，將為判斷腫瘤生物學(xué)行為和預(yù)后提供指標(biāo)，也為最終闡明卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制提供線索。方法：5例正常卵巢組織，10例卵巢良性上皮性腫瘤，35例卵巢惡性上皮性癌，其中11例同時(shí)取了轉(zhuǎn)移灶。原發(fā)灶取自卵巢部位腫瘤，轉(zhuǎn)移灶為轉(zhuǎn)移至大網(wǎng)膜部位的卵巢癌組織。所有標(biāo)本術(shù)后立即置

2、液氮驟凍(30min)，80℃冰箱儲(chǔ)存?zhèn)溆?。按照nO要求進(jìn)行病理分類。術(shù)后行順鉑、環(huán)磷酰胺(Pc)方案化療6個(gè)療程，隨訪18—24個(gè)月。1半定量逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RTPCR)方法檢測(cè)p?；虻谋磉_(dá)。約70mg組織置于勻漿器中，加入變性液，快速于冰浴中勻漿，然后加醋酸鈉、水飽和酚、氯仿異戊醇4℃10000rpm離心20分鐘，水相上清，用異丙醇沉淀RNA。乙醇洗滌后溶于DEPC水，用紫外分光光度儀測(cè)其在260nm和280nm波長(zhǎng)的OD值

3、，以檢測(cè)RNA的含量及純度。2％瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)其完整性，取2ug總RNA用于RT—PCR反應(yīng)。PCR產(chǎn)物在2％瓊脂糖凝膠上電泳。然后用明膠成像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析，用Baction作為內(nèi)參照。2免疫組織化學(xué)方法進(jìn)行a，B。蛋白定位，標(biāo)本進(jìn)行冷凍切片，用冷的丙酮固定15min，3％甲醇稀釋的過氧化氫室溫孵育15min，以去除內(nèi)源性過氧化物酶，10％正常山羊血清封閉非特異抗原。加入小鼠抗人a，B。MAb抗體在4℃孵育16hr，加入生物素標(biāo)記