汞中毒性白內(nèi)障中HSP70和MT-Ⅱ蛋白表達(dá)變化.pdf

1、目的：檢測暴露于不同濃度汞蒸汽后大鼠晶狀體中熱休克蛋白70(HSP70)、金屬硫蛋白(MT-Ⅱ)表達(dá)含量的變化，探討其在汞中毒性白內(nèi)障形成中的作用和意義。
　　 方法：選用體重約350g-400g的成年雄性SD大鼠56只隨機(jī)分為三組，低濃度組(24只)、高濃度組(24只)和對照組(8只)。將實驗組大鼠在玻璃箱中進(jìn)行靜式吸入染毒，每日30分鐘，每周6天。低濃度組吸入汞蒸汽最高濃度為0.01mg/m3，高濃度組吸入汞蒸汽濃度為3 m

2、g/m3以上。正常對照組不予任何處理，檢查晶狀體透明后即取材。在第一次染毒后第1周末、第2周末、第3周末和第4周末分別取材12鼠(低濃度組6只、高濃度組6只)。全身麻醉后取一只眼球分離晶狀體置液氮中用于做Western Blotting檢測HSP70和MT-Ⅱ的表達(dá)；將大鼠全身用4％多聚甲醛溶液灌注固定后取另一眼球用于做免疫組化檢測HSP70、MT-Ⅱ的表達(dá)。
　　 結(jié)果：⑴不同時期裂隙燈下觀察晶狀體渾濁度：對照組晶體透明無變化

3、；低濃度染毒組第3周出現(xiàn)部分大鼠晶體前囊少量點狀混濁，第4周出現(xiàn)晶體前囊點狀混濁；高濃度染毒組第3周出現(xiàn)前囊淺灰色點狀混濁，第4周出現(xiàn)前囊點狀混濁伴皮質(zhì)輕度混濁。⑵免疫組化檢測和Western Blotting檢測提示HSP70在對照組中和實驗組中的晶狀體上皮細(xì)胞表達(dá)有顯著性差異，低濃度組與高濃度組表達(dá)有差異，與濃度及時間均有相關(guān)；MT-Ⅱ在對照組和實驗組的表達(dá)有差異，與時間相關(guān)，隨時間延長依次遞增，與濃度無明顯相關(guān)；HSP70與MT-

4、Ⅱ在晶體上皮細(xì)胞中的表達(dá)存在正相關(guān)性。
　　 結(jié)論：熱休克蛋白HSP70與金屬硫蛋白MT-Ⅱ在汞中毒性白內(nèi)障晶體上皮細(xì)胞中均有陽性表達(dá)，HSP70的表達(dá)水平與汞中毒的濃度和作用時間有明顯的相關(guān)性，MT-Ⅱ的表達(dá)水平與汞中毒的時間有相關(guān)性與汞中毒的濃度無明顯相關(guān)性，HSP70與MT-Ⅱ在汞中毒性白內(nèi)障發(fā)展過程中兩者的表達(dá)水平之間存在正相關(guān)性，提示HSP70與MT-Ⅱ在汞中毒性白內(nèi)障的發(fā)生發(fā)展過程中均有一定的保護(hù)作用，HSP70與M