含氫乳酸鈉林格液對減輕小鼠供體心臟移植冷缺血再灌注損傷作用的研究.pdf

1、目的:氫氣被發(fā)現(xiàn)作為一個有效的氣體抗氧化劑，可與體內(nèi)活性氧（ROS）中的羥自由基（-OH）、亞硝基（ONOO-）選擇特異性的結(jié)合，發(fā)揮氧自由基清除劑的作用，從而減輕或消除因為過量的ROS引起的病理生理損傷。
　　本課題擬探索富含氫氣的乳酸鈉林格液能否減輕同系小鼠異位心臟移植過程中供體心臟的冷缺血再灌注損傷。
　　方法:采用日本MIZ會社生產(chǎn)的制氫劑（Aquela），制備4℃含氫濃度為4ppm飽和乳酸鈉林格液，將小鼠心臟離體后

2、保存于含氫乳酸鈉林格液中，保存30min后進行同系小鼠頸部異位心臟移植。于心臟移植后恢復(fù)血供前，即缺血再灌注前3min予腹腔注射37℃含氫乳酸鈉林格液1ml，并于術(shù)后每隔12h腹腔注射0.5ml含氫乳酸鈉林格液。而對照組均相應(yīng)使用不含氫的普通乳酸鈉林格液。分別于再灌注后24h、48h、72h后檢測小鼠血清的心肌酶譜，觀察移植心臟組織形態(tài)學(xué)變化，檢測心肌細胞凋亡情況，炎癥因子基因表達水平以及MDA蛋白表達水平。
　　結(jié)果:心臟移植再

3、灌注后24h時，含氫乳酸鈉林格液治療組與對照組相比血清中心肌酶譜的肌酸激酶（CK）、乳酸脫氫酶（LDH）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）顯著降低（P均＜0.01），再灌注48h時實驗組血清心肌酶譜中CK、LDH、AST仍明顯低于對照組小鼠（P均＜0.01），而再灌注72h時血清中心肌酶譜無顯著差異（P均＞0.05）。移植物組織HE染色發(fā)現(xiàn)含氫組間質(zhì)水腫，心肌結(jié)構(gòu)，炎癥細胞浸潤較對照組有顯著改善。心肌細胞Tunel凋亡檢測發(fā)現(xiàn)再灌注24h

4、含氫組較對照組有顯著的降低（P＜0.01），再灌注48h實驗組較對照組有顯著的降低（P＜0.05），而再灌注72h二組無顯著差異（P＞0.05）。實時熒光定量RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)再灌注24h、48h、72h時移植物炎癥因子基因表達水平IL-1β、IL-6、MCP-1、TNF-α均較對照組有顯著降低（P均＜0.01），內(nèi)源性配體 HAS-1，HMGB-1也有顯著降低（P均＜0.05）。移植物組織MDA檢測發(fā)現(xiàn)再灌注24h、48h、72h時