鐵皮石斛原球莖形態(tài)發(fā)甡NAC家族的生物信息學(xué)分析.pdf

1、鐵皮石斛(Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.)是一種重要的蘭科植物，具有很高的藥用價(jià)值和觀賞價(jià)值，但人類過度采挖和破壞其生境，以及野生鐵皮石斛繁殖周期長，繁殖率低，致其淪為瀕危物種。本文以鐵皮石斛為材料，在果莢保存及種子萌發(fā)、原球莖發(fā)生形態(tài)學(xué)過程、原球莖發(fā)生細(xì)胞學(xué)過程和調(diào)控原球莖原分生組織形成的NAC基因生物信息學(xué)分析這四方面工作進(jìn)行了研究，以期成為保護(hù)鐵皮石斛種質(zhì)資源的重要手段，并對(duì)育種繁殖工作提供參

2、考。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　(1)在不進(jìn)行超低溫保存實(shí)驗(yàn)情況下，果莢最優(yōu)的貯藏方式是表面消毒后置于4℃真空環(huán)境，可保存4個(gè)月，且種子萌發(fā)率可達(dá)90％以上。
　　(2)鐵皮石斛正常種子為黃綠色，呈兩端微尖的紡錘形，種皮中間有橢圓狀的種胚，由幾十個(gè)細(xì)胞組成。種皮為一層長形薄壁細(xì)胞，細(xì)胞透明，無內(nèi)容物，其加厚環(huán)紋有一定的偏轉(zhuǎn)角度。紡錘形狀的種皮兩端不同，一端較細(xì)尖，另一端則比較鈍圓。種胚平均長度為180μm，寬度為120μm，種皮

3、長度為400μm，寬度為120μm，種胚和種子長度比為22.2％。
　　(3)在鐵皮石斛種子非共生培養(yǎng)過程中，25d左右突破種皮，原球莖頂端會(huì)出現(xiàn)一些綠色素積累，底端自胚內(nèi)出現(xiàn)群體散射狀吸收毛。一周后發(fā)育成圓球形，40d左右原球莖的頂端出現(xiàn)凹陷，隨后凹陷處出現(xiàn)凸起并填滿凹陷，凸起持續(xù)發(fā)育成為子葉，子葉側(cè)翼再形成小溝，再歷時(shí)一個(gè)月逐漸發(fā)育成橢球形，并有真葉從子葉對(duì)側(cè)溝內(nèi)長出，80d左右成為啞鈴形，原球莖底端逐漸降解，90d左右出現(xiàn)了

4、根，最后形成幼苗共需110d左右。
　　(4)原球莖縱橫比的變化趨勢主要受原球莖縱向和橫向細(xì)胞分裂生長速率的影響，45天后以原球莖長度增加為主。果莢中端的種子活力最強(qiáng)，接種時(shí)所需單個(gè)果莢的種子數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于果莢內(nèi)種子含量時(shí)，應(yīng)盡量選取位于中端的種子。光照對(duì)處于圓球期及以前的原球莖發(fā)生無明顯影響，暗培養(yǎng)只延緩隨后的發(fā)生過程，并能增加原球莖長度。
　　(5)通過常規(guī)石蠟切片技術(shù)，以處于不同形態(tài)階段的原球莖為材料，研究了原球莖發(fā)生的