北冬蟲(chóng)夏草液體培養(yǎng)條件的優(yōu)化與誘變育種.pdf

1、北冬蟲(chóng)夏草屬于麥角菌科蟲(chóng)草屬，與冬蟲(chóng)夏草同屬，異種，它生長(zhǎng)在中山區(qū)或淺山區(qū)，能夠在多種昆蟲(chóng)的蛹上寄生。北冬蟲(chóng)夏草對(duì)于生長(zhǎng)環(huán)境的要求較低，液體發(fā)酵可形成菌絲體，人工大規(guī)模固體培養(yǎng)可獲得子座，藥用價(jià)值與馳名中外的冬蟲(chóng)夏草相似。北冬蟲(chóng)夏草的成分如蟲(chóng)草多糖和蟲(chóng)草酸，與天然冬蟲(chóng)夏草的含量相當(dāng)，有些成分的含量甚至超過(guò)天然冬蟲(chóng)夏草，如蟲(chóng)草素的含量是天然冬蟲(chóng)夏草的35倍[2]。其有效活性成分蟲(chóng)草多糖(CMPS)被認(rèn)為是非特異性免疫調(diào)節(jié)劑，可激活肌體的免

2、疫活性細(xì)胞,為我國(guó)名貴的藥用真菌。但北冬蟲(chóng)夏草野生資源少，極大的限制了它的應(yīng)用，而人工培養(yǎng)可彌補(bǔ)此點(diǎn)，特別是液體發(fā)酵可使北冬蟲(chóng)夏草的應(yīng)用成為可能。目前人工栽培獲得成功并開(kāi)發(fā)了系列產(chǎn)品，為滋補(bǔ)保健食品、功能食品和藥源開(kāi)辟了新的途徑，隨著科技進(jìn)步，其栽培、應(yīng)用前景十分廣闊。 本研究對(duì)北冬蟲(chóng)夏草子實(shí)體進(jìn)行組織分離，制備菌種，以此作為出發(fā)菌株，利用紫外線、微波及其二者結(jié)合分別對(duì)出發(fā)菌株進(jìn)行誘變的研究，探討了處理劑量、時(shí)間等因素對(duì)誘變結(jié)果

3、的影響。經(jīng)三種誘變方法的誘變，并以其多糖含量和生物量為試驗(yàn)指標(biāo)，進(jìn)行測(cè)量。同時(shí)對(duì)其進(jìn)行遺傳穩(wěn)定性試驗(yàn)，結(jié)果表明該菌株的多糖生產(chǎn)能力比較穩(wěn)定，經(jīng)2次傳代，其生物性能穩(wěn)定。對(duì)原菌株進(jìn)行液體培養(yǎng)條件研究，獲得了一個(gè)最佳搖瓶培養(yǎng)條件為：蛋白胨1.5％，蔗糖2％，KH2PO40.1％，MgSO40.1％，溫度20℃，pH7，轉(zhuǎn)速為170r/min，發(fā)酵時(shí)間5d。，在此條件下對(duì)對(duì)照菌株和誘變菌株進(jìn)行了培養(yǎng)，對(duì)照菌株蟲(chóng)草多糖含量為28.9692mg，

4、誘變菌株蟲(chóng)草多糖含量為 30.4243 mg，誘變菌株比對(duì)照菌株高5％。同時(shí)對(duì)對(duì)照菌株和誘變菌株進(jìn)行了固體培養(yǎng)，對(duì)其蟲(chóng)草多糖含量進(jìn)行了測(cè)定，對(duì)照菌株多糖含量為2.7955mg/g培養(yǎng)基，誘變菌株3.2713 mg/g 培養(yǎng)基，誘變菌株比對(duì)照菌株高17％ 。在此培養(yǎng)條件下誘變菌株多糖含量顯著提高，有一定的應(yīng)用價(jià)值。 本研究的創(chuàng)新點(diǎn)在于：首次嘗試應(yīng)用北冬蟲(chóng)夏草菌絲體片段進(jìn)行物理誘變育種，包括紫外線誘變和微波誘變，以及紫外和微波的復(fù)合