轉(zhuǎn)GFP青枯雷爾氏菌無致病力菌株對番茄青枯病免疫抗病效果的研究.pdf

1、細(xì)菌性青枯病是一種由青枯雷爾氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的植物毀滅性病害，廣泛分布于熱帶、亞熱帶及溫帶地區(qū)。青枯雷爾氏菌寄主廣泛，可以侵染44個(gè)科數(shù)百種植物，對農(nóng)業(yè)造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失。青枯病的生物防治越來越引起大家的重視。本文觀察比較了青枯雷爾氏菌無致病力菌株Rs-L.1.3-020626-1A轉(zhuǎn)GFP基因前后的菌落形態(tài)和單細(xì)胞形態(tài)；研究了無致病力菌株GFP-Rs-L.1.3-020626-1A對番茄組培苗

2、的侵染特性，篩選出了最適侵染體系；研究了GFP-Rs-L.1.3-020626-1A對番茄組培苗青枯病的免疫抗病效果，并將其用于盆栽苗實(shí)驗(yàn)，初步研究了對番茄盆栽苗的免疫抗病效果。 研究結(jié)果表明：無致病力菌株GFP-Rs-L.1.3-020626-1A以菌液濃度為104cfu/mL通過傷根法侵染番茄組培苗并將組培苗置于30℃培養(yǎng)的情況下，侵染效果較好，將這個(gè)體系應(yīng)用于日后的研究中。GFP-Rs-L.1.3-020626-1A在組培

3、苗內(nèi)隨著時(shí)間的推移菌含量不斷增加，并沒有出現(xiàn)像搖瓶培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)的平臺期。不同的浸根時(shí)間對GFP-Rs-L.1.3-020626-1A在盆栽苗體內(nèi)的含量影響不大。GFP-Rs-L.1.3-020626-1A在番茄盆栽苗體內(nèi)的繁殖量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于在組培苗體內(nèi)的繁殖量。 GFP-Rs-L.1.3-020626-1A對延遲番茄組培苗青枯病發(fā)病時(shí)間以及降低發(fā)病率有顯著的效果。GFP-Rs-L.1.3-020626-1A與強(qiáng)致病力菌株Rs-F.1.

4、2-010618-07V以1:1混合回接組培苗的各處理中，均表現(xiàn)出發(fā)病時(shí)間有推遲的現(xiàn)象，其中菌液濃度為104cfu/mL的處理在接菌后第8d開始有組培苗發(fā)病，比對照推遲了3d。GFP-Rs-L.1.3-020626-1A與Rs-F.1.2-010618-07V菌株菌液以不同配比接入番茄組培苗的各個(gè)處理之間差別不大。GFP-Rs-L.1.3-020626-1A與Rs-F.1.2-010618-07V菌株接入組培苗的時(shí)間間隔對青枯病的免疫抗

5、病效果影響較大。當(dāng)Rs-F.1.2-O10618-07V比GFP-Rs-L.1.3.020626-1A早或同時(shí)接入，組培苗的發(fā)病時(shí)間由所延遲但發(fā)病率并沒有明顯降低。當(dāng)GFP-Rs-L.1.3-020626-1A比Rs-F.1.2-010618-07V早接入，組培苗不僅發(fā)病時(shí)間有所延遲，發(fā)病率也顯著降低。GFP-Rs-L.1.3-020626-1A比Rs-F.1.2-010618-07V早接入4d的處理發(fā)病時(shí)間為11d，比對照延遲了7d；