番茄內(nèi)生放線菌多樣性及其對青枯病防效研究.pdf

1、本研究對廣州市番禺、康樂和赤崗三地種植的對青枯病抗性的番茄品種益豐、敏感品種益農(nóng)101的健康和枯萎植株、中抗品種夏紅的內(nèi)生放線菌進行分離、鑒定，并對內(nèi)生菌分離物產(chǎn)鐵載體能力、產(chǎn)細菌細胞壁溶解酶能力、對青枯菌拮抗活性進行了測定。發(fā)現(xiàn)所分離的絕大多數(shù)內(nèi)生放線菌屬于鏈霉菌屬，其中金色類群鏈霉菌的分離頻率最高為23.7％-48.7％，是番茄植株中的優(yōu)勢內(nèi)生放線菌類群。鏈霉菌的類群組成隨著番茄品種、生理狀況以及采樣點土壤的不同而有所不同?；ǘ挤N植

2、的植株中，屬于鏈霉菌金色類群的金色產(chǎn)色鏈霉菌樣菌株是抗性品種的優(yōu)勢菌株，并且分離比例在抗性品種中高于敏感品種(P<0.05)。從康樂植株中分離的白孢類群數(shù)量在抗性品種、中抗品種及敏感品種中呈現(xiàn)明顯降低趨勢，屬于白孢類群的阿布拉鏈霉菌樣菌株是抗性品種的優(yōu)勢菌株。同樣在赤崗植株中，抗性品種白孢類群分離頻率高于敏感品種(P<0.05)，阿布拉鏈霉菌樣菌株也是抗性品種的優(yōu)勢菌株。估計該類菌株與植株的抗病性有關(guān)。 從健康的番茄植株和從枯萎

3、的番茄植株分離出來的內(nèi)生鏈霉菌在抗青枯菌菌株比例方面有很大的不同，前者的比例要遠高于后者(P<0.05)，而不同品種(健康或枯萎)植株分離出來的對青枯菌具有拮抗作用的鏈霉菌株比例并沒有顯著不同(P>0.05)。在鏈霉菌的產(chǎn)鐵載體活性方面，從同一采樣點分離出來的產(chǎn)鐵載體菌株比例并沒有顯著差別(P>0.05)，相反，不同地點分離得到的菌株在產(chǎn)鐵載體比例方面卻相差很大(P<0.05)。在鏈霉菌的細菌細胞壁溶解酶活性方面，從枯萎番茄植株中分離出

4、來的放線菌的產(chǎn)細胞壁溶解酶比例，要明顯高于從健康植株分離出來的菌株的產(chǎn)細胞壁溶解酶比例(P<0.05)。但是，產(chǎn)細胞壁溶解酶的放線菌比例與番茄品種沒有必然的聯(lián)系(P>0.05)，卻與宿主植株生理狀況(如植株是健康或是枯萎)相關(guān)。這些結(jié)果說明，內(nèi)生鏈霉菌的抗青枯菌和產(chǎn)細菌細胞壁溶解酶的比例均與宿主植株的生理狀況有關(guān)，而其產(chǎn)鐵載體菌株比例則受到采樣點的影響。因此我們認為內(nèi)生鏈霉菌的類群組成和生理特征與宿主植株的生理狀況和采樣點土壤的特征密切

5、相關(guān)。對實驗中分離到的有代表性的在平板上對青枯菌有頡抗的內(nèi)生放線菌菌株進行16S rDNA分子鑒定，結(jié)果表明所分離鑒定的菌株全部屬于鏈霉菌屬，與根據(jù)形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果基本一致，為分離到的頡抗內(nèi)生放線菌菌株從分子水平上明確了歸屬。 使用不依賴于培養(yǎng)的方法對番茄內(nèi)生放線菌類群多樣性進行了研究，檢測到一批未培養(yǎng)的內(nèi)生放線菌，其多樣性超過了分離培養(yǎng)方法得出的結(jié)果。用此方法檢測到的番茄內(nèi)生放線菌種類有鏈霉菌屬，節(jié)桿菌屬，涅斯捷連科氏菌屬，微桿

6、菌屬，纖維單胞菌屬，丙酸桿菌屬未培養(yǎng)的細菌及未培養(yǎng)放線菌。其中，鏈霉菌屬是優(yōu)勢類群，分離頻率達51.6％-64.8％。涅斯捷連科氏菌屬、節(jié)桿菌屬、Uncultured bacteritim在四個番茄樣品中均能分離到。健康抗性品種中鏈霉菌種類比敏感品種及枯萎植株分離的鏈霉菌種類少。同時，健康抗性品種中與Streptomyces virginiae菌株相似性達98％以上的菌株占40.32％，在敏感品種及枯萎番茄中明顯減少(P<0.05)。它