大鼠胚胎期嗅上皮中嗅細(xì)胞發(fā)育及細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、[研究背景] 嗅覺是哺乳動物的重要感覺器官之一，它同視覺、聽覺一樣，是人體捕獲外界信息的特殊裝置。人類的嗅覺具有辨別氣味、增進(jìn)食欲、識別環(huán)境、報警等作用。嗅覺還通過中樞神經(jīng)系統(tǒng)影響人的情緒、調(diào)節(jié)生命周期。對一些特殊職業(yè)，如香精師、美食家、偵察員、醫(yī)師、公安消防人員等，靈敏的嗅覺更是必不可少。嗅神經(jīng)元是唯一暴露在外界環(huán)境中的神經(jīng)元容易受到外界的損傷。FrankME等報道人類永久性嗅覺障礙發(fā)病率約1.2％，暫時性嗅覺障礙發(fā)病率約62

2、.4％，由于缺乏客觀檢查方法和發(fā)生機(jī)制不明等原因，嗅覺障礙一直缺乏有效的治療方法。隨著人們生活水平的提高，生活質(zhì)量有更高的要求，嗅覺越來越引起重視。本實(shí)驗(yàn)通過對大鼠嗅感覺上皮發(fā)育過程的組織化學(xué)及大鼠嗅上皮細(xì)胞凋亡的研究以期對嗅覺障礙的發(fā)生及治療提供一定的理論依據(jù)。 [研究目的] 免疫組化方法檢測神經(jīng)特異性烯醇酶(NSE)及嗅細(xì)胞標(biāo)記蛋白(OMP)在胎鼠嗅上皮發(fā)育過程中的表達(dá)，末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記

3、技術(shù)(TUNEL)檢測胎鼠嗅上皮發(fā)育過程中的細(xì)胞凋亡，以揭示哺乳動物胚胎期嗅上皮的發(fā)生、發(fā)育、成熟及凋亡過程。 [研究方法] 取大鼠不同孕期(E13-E21)胚胎鼻部標(biāo)本，免疫組化方法檢測神經(jīng)特異性烯醇酶(NSE)及嗅細(xì)胞標(biāo)記蛋白(OMP)在不同胎齡胎鼠嗅上皮中的表達(dá)及其規(guī)律。TUNEL方法檢測其嗅上皮細(xì)胞凋亡，并計算細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)。統(tǒng)計學(xué)方法數(shù)據(jù)以x±s表示，采用spss10.0統(tǒng)計軟件處理，各組間平均數(shù)比較采用

4、非參數(shù)秩和檢驗(yàn)，P<0.05為具有統(tǒng)計學(xué)意義。 [結(jié)果] 大鼠E13天胎鼠嗅上皮中即有神經(jīng)特異性烯醇酶表達(dá)(NSE)，細(xì)胞數(shù)量多，細(xì)胞排列尚不規(guī)律，沒有形成典型的柱狀上皮形念。隨胎齡增加陽性細(xì)胞數(shù)量增加，排列規(guī)律，細(xì)胞形態(tài)更接近雙極細(xì)胞。E14-E21天胎鼠，在嗅上皮中均可見大量陽性細(xì)胞。E13天胎鼠嗅上皮中未見OMP陽性表達(dá)細(xì)胞。在大鼠E14天胎鼠，嗅上皮中開始出現(xiàn)嗅細(xì)胞標(biāo)記蛋白(OMP)陽性細(xì)胞，數(shù)量少散在分布，隨胎

5、齡增加陽性細(xì)胞數(shù)量增多。至E17天達(dá)高峰，以后漸趨穩(wěn)定。在E13天胎鼠嗅上皮中可見細(xì)胞凋亡，細(xì)胞凋亡數(shù)量少，E13-E15天胎鼠嗅上皮中細(xì)胞凋亡數(shù)量較穩(wěn)定，至E16天胎鼠嗅上皮中凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯增加，達(dá)到高峰，E18天-E21天胎鼠嗅上皮中凋亡細(xì)胞數(shù)量逐漸減少漸趨于穩(wěn)定。E16天胎鼠嗅上皮中凋亡指數(shù)與其他天數(shù)之間P<0.05，差異有顯著性。其他組間P>0.05。 [結(jié)論] 嗅細(xì)胞標(biāo)記蛋白(OMP)與神經(jīng)特異性烯醇化酶(N