單抗及其組合檢測(cè)循環(huán)抗原對(duì)血吸蟲(chóng)病診斷的研究.pdf

1、血吸蟲(chóng)循環(huán)抗原是蟲(chóng)體自身分泌成分，具有反映活動(dòng)性感染和蟲(chóng)負(fù)荷，治療后消失較快的特點(diǎn)，能用于療效考核的評(píng)價(jià)，尋找既滿(mǎn)足敏感性又具有療效考核價(jià)值的循環(huán)抗原檢測(cè)途徑是血吸蟲(chóng)病診斷研究面臨的挑戰(zhàn)。血吸蟲(chóng)特異性抗體檢測(cè)有較高的敏感性，但由于病人治療后抗體仍長(zhǎng)期存在，抗體檢測(cè)不能區(qū)分既往感染和新近感染，難以用于現(xiàn)場(chǎng)診斷和療效考核。 本研究采用單克隆抗體夾心ELISA和常規(guī)ELISA方法，研究和建立了同步檢測(cè)血吸蟲(chóng)循環(huán)抗原和循環(huán)抗體的血吸蟲(chóng)病

2、復(fù)合檢測(cè)系統(tǒng)并評(píng)估了其診斷效能，分析了復(fù)合檢測(cè)與循環(huán)抗原和循環(huán)抗體檢測(cè)的效果和相互關(guān)系，及其在療效考核、個(gè)體診斷和疫區(qū)應(yīng)用上的價(jià)值。同時(shí)還建立了抗腸相關(guān)抗原JPG5株和抗可溶性蟲(chóng)卵抗原JPS6株單克隆抗體對(duì)血吸蟲(chóng)病診斷的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)并予以了評(píng)價(jià)。在此基礎(chǔ)上，嘗試了單克隆抗體的同類(lèi)和異類(lèi)組合對(duì)循環(huán)抗原的多表位檢測(cè)，以探索改善和提高對(duì)血吸蟲(chóng)循環(huán)抗原診斷效能的途徑。 單克隆抗體JPG3的循環(huán)抗原檢測(cè)和抗SEA抗體檢測(cè)敏感性分別為78.7％

3、和95.7％；特異性分別為93.7％和96.1％；Youden指數(shù)分別為0.725和0.918；JPG3可以作為循環(huán)抗原檢測(cè)的一個(gè)探針。對(duì)療效考核血清檢測(cè)表明：治療半年后循環(huán)抗原和循環(huán)抗體陽(yáng)性率分別為65.0％和90.0％，治療一年后則分別為55.0％和82.5％，前者顯著低于后者，表明JPG3對(duì)循環(huán)抗原的檢測(cè)具有一定的療效考核效果，而對(duì)循環(huán)抗體檢測(cè)則無(wú)療效考核價(jià)值。 平行檢測(cè)與序列檢測(cè)的敏感性分別為95.7％與75.9％，特異

4、性為92.2％和99.2％，平行檢測(cè)能提高敏感性，序列檢測(cè)能提高特異性。平行檢測(cè)對(duì)疫區(qū)非感染人群陽(yáng)性率為89.8％，序列試驗(yàn)為40.7％，后者的高特異性有利于減少對(duì)疫區(qū)非感染者的誤檢。 JPG5和JPS6株單抗的檢測(cè)敏感性分別為74.3％和78.7％，特異性為96.8％和95.2％，Youden指數(shù)為0.711和0.731，交叉反應(yīng)均較低。表明兩者的診斷效能基本相同，可用做較好的循環(huán)抗原檢測(cè)的備選探針。 治療半年和一年后

5、患者血清，JPG5檢測(cè)的陰轉(zhuǎn)率分別為41.4％和65.5％，JPS6檢測(cè)的陰轉(zhuǎn)率分別為40.1％和43.8％，JPG5和JPS6單抗對(duì)治療半年后的療效考核效果相近；JPG5對(duì)治療一年后的療效考核優(yōu)于JPS6。表明以腸相關(guān)抗原為靶抗原的JPG5比以蟲(chóng)卵相關(guān)抗原為靶抗原的JPS6具有更好的療效考核效果。在JPG3、JPG5和JPS6三株單抗中以JPG5的療效考核價(jià)值最高。JPG5+JPG1同類(lèi)組合和JPS6+JPG1異類(lèi)組合對(duì)循環(huán)抗原多表位

6、檢測(cè)敏感性分別為80.1％和73.5％，特異性分別為97.7％和96.1％，Youden指數(shù)分別為0.737和0.696，兩組合診斷效能相近。與單表位檢測(cè)比較，兩種組合均未能取得比單獨(dú)使用單抗JPG5和JPS6更好的檢測(cè)效果或明顯改善診斷效能，本研究采用同步檢測(cè)血吸蟲(chóng)循環(huán)抗原和循環(huán)抗體，建立復(fù)合檢測(cè)系統(tǒng)，為血吸蟲(chóng)病防治和診斷提供了新的思路。對(duì)不同單抗進(jìn)行組合后用于對(duì)循環(huán)抗原檢測(cè)，探索了提高血吸蟲(chóng)循環(huán)抗原診斷敏感性新途徑。期望復(fù)合檢測(cè)和組